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木虫 (小有名气)

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[求助] 偶联率计算

计算偶联率时，载体蛋白最大吸收峰的确定是根据产物来定的吗？比如BSA，它有2个最大吸收峰，232nm和278nm，产物的最大吸收峰在231nm和268nm的话，应该使用的是278nm吗？

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别让年轮背上沉重的包袱，轻装上阵，让活力迸发，在生活中寻求进步在工作中体验快乐，善待他人善待自己，追求完美与时俱进，默默奉献，做一片绿叶为花增彩！

1楼 2013-10-14 14:00:19

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yi_wang

铁杆木虫 (著名写手)

roye

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

可以看看南京大学出版社《酶免疫测定技术》 1998,7中有相关内容

分别配制一定浓度的BSA、小分子药物、两者偶联物的溶液。分别测定AAam、AAbm、ABam、ABbm、ACam和ACbm（A a、B b、C c分别指小分子药物、BSA和偶联物，AAam、ABam和ACam分别指这三种物质在小分子药物特征吸收波长处的紫外吸光值，AAbm、ABbm和ACbm分别指三种物质在BSA特征吸收波长（280 nm左右）处的紫外吸光值）；同时根据小分子药物和BSA两种物质的浓度分别计算KAam 、KAbm 、KBam 和KBbm[KAxm= AAxm/（ρx/Mx）,x代a,b,c；ρ为浓度，M为摩尔质量]，然后代入下面公式求出A、B两物质摩尔比。

Ca/Cb*=(ACam×KBbm－ACbm×KBam)/ (ACbm×KAam－ACam×KAbm)
*注：式中Ca/Cb 为偶联物中A、B两种物质克分子浓度比。