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雨天等你

木虫 (小有名气)

[求助] 偶联率计算

计算偶联率时,载体蛋白最大吸收峰的确定是根据产物来定的吗?比如BSA,它有2个最大吸收峰,232nm和278nm,产物的最大吸收峰在231nm和268nm的话,应该使用的是278nm吗?
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yi_wang

铁杆木虫 (著名写手)

roye

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以看看南京大学出版社《酶免疫测定技术》 1998,7中有相关内容

分别配制一定浓度的BSA、小分子药物、两者偶联物的溶液。分别测定AAam、AAbm、ABam、ABbm、ACam和ACbm(A a、B b、C c分别指小分子药物、BSA和偶联物,AAam、ABam和ACam分别指这三种物质在小分子药物特征吸收波长处的紫外吸光值,AAbm、ABbm和ACbm分别指三种物质在BSA特征吸收波长(280 nm左右)处的紫外吸光值);同时根据小分子药物和BSA两种物质的浓度分别计算KAam 、KAbm 、KBam 和KBbm[KAxm= AAxm/(ρx/Mx),x代a,b,c;ρ为浓度,M为摩尔质量],然后代入下面公式求出A、B两物质摩尔比。

Ca/Cb*=(ACam×KBbm-ACbm×KBam)/ (ACbm×KAam-ACam×KAbm)
*注:式中Ca/Cb 为偶联物中A、B两种物质克分子浓度比。
哥泡的不是论坛,是寂寞....
2楼2013-10-14 14:10:05
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雨天等你

木虫 (小有名气)

其中对K的求法很为难呀,其中ρ/M是指物质浓度吗?能直接代入C(mg/ml)吗?
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3楼2013-10-14 15:11:07
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雨天等你

木虫 (小有名气)

貌似不对,ρ/M是mol/ml,是吧?但是K可以使用A/C计算吧?
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4楼2013-10-14 15:15:19
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yi_wang

铁杆木虫 (著名写手)

roye

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 雨天等你 at 2013-10-14 15:15:19
貌似不对,ρ/M是mol/ml,是吧?但是K可以使用A/C计算吧?

KAxm= AAxm/(ρx/Mx),x代a,b,c;ρ为浓度,M为摩尔质量
A/C貌似不太对吧?
哥泡的不是论坛,是寂寞....
5楼2013-10-14 18:12:07
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