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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 工艺研究 » 偶联率计算
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雨天等你

木虫 (小有名气)

[求助] 偶联率计算

计算偶联率时，载体蛋白最大吸收峰的确定是根据产物来定的吗？比如BSA，它有2个最大吸收峰，232nm和278nm，产物的最大吸收峰在231nm和268nm的话，应该使用的是278nm吗？
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1楼 2013-10-14 14:00:19
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yi_wang

铁杆木虫 (著名写手)

roye

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以看看南京大学出版社《酶免疫测定技术》 1998,7中有相关内容

分别配制一定浓度的BSA、小分子药物、两者偶联物的溶液。分别测定AAam、AAbm、ABam、ABbm、ACam和ACbm（A a、B b、C c分别指小分子药物、BSA和偶联物，AAam、ABam和ACam分别指这三种物质在小分子药物特征吸收波长处的紫外吸光值，AAbm、ABbm和ACbm分别指三种物质在BSA特征吸收波长（280 nm左右）处的紫外吸光值）；同时根据小分子药物和BSA两种物质的浓度分别计算KAam 、KAbm 、KBam 和KBbm[KAxm= AAxm/（ρx/Mx）,x代a,b,c；ρ为浓度，M为摩尔质量]，然后代入下面公式求出A、B两物质摩尔比。

Ca/Cb*=(ACam×KBbm－ACbm×KBam)/ (ACbm×KAam－ACam×KAbm)
*注：式中Ca/Cb 为偶联物中A、B两种物质克分子浓度比。
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哥泡的不是论坛,是寂寞....
2楼2013-10-14 14:10:05
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雨天等你

木虫 (小有名气)
其中对K的求法很为难呀，其中ρ/M是指物质浓度吗？能直接代入C（mg/ml）吗？
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3楼2013-10-14 15:11:07
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雨天等你

木虫 (小有名气)
貌似不对，ρ/M是mol/ml，是吧？但是K可以使用A/C计算吧？
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4楼2013-10-14 15:15:19
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yi_wang

铁杆木虫 (著名写手)

roye

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 雨天等你 at 2013-10-14 15:15:19
貌似不对，ρ/M是mol/ml，是吧？但是K可以使用A/C计算吧？

KAxm= AAxm/（ρx/Mx）,x代a,b,c；ρ为浓度，M为摩尔质量
A/C貌似不太对吧？
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哥泡的不是论坛,是寂寞....
5楼2013-10-14 18:12:07
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