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秦运杰223

铜虫 (正式写手)


[交流] 求助----原核表达问题:实际表达的蛋白大小与预测的相差较大

本人做原核表达开始还比较顺利,从目的基因扩增到表达载体的构建等一步步走过来,到蛋白表达,期间做了几次都没有成功,目的条带预计是50kda左右,而实际表达蛋白经蛋白电泳20左右,所构建的原核表达载体测序正确,不知道可能会是什么原因?求各位帮忙指教!!
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uandme1

新虫 (初入文坛)



秦运杰223(金币+1): 谢谢参与
楼主你好!你的问题解决的了没,全长有没有表达出来?怎么解决的?我现在也是遇到这种问题,预计要表达的蛋白51KDa,现在表达出来总是30左右,测序基因和读码框都没错,很郁闷。
63楼2013-12-29 12:01:03
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longanzz

至尊木虫 (著名写手)



秦运杰223(金币+1): 谢谢参与
你先看看你的阅读框有没有移位,链接到载体上看看有没有提前终止的,如果这些都没有问题的话,在考虑表达的问题。
11楼2013-10-10 15:17:28
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