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michaelzang木虫 (小有名气)
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脂质体的制备---薄膜分散的困惑
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各位脂质体达人，大家好： 我现在正在制备脂质体，期间遭遇了不少问题，希望大家不吝赐教给我这个笨人予以解惑。我是采用普通磷脂和胆固醇进行处方筛选，主要考察粒径稳定性等，而包封率药物释放等，由于后期需要用其他功能磷脂予以替换，故不予考察。此外，由于考虑到后期的功能磷脂替换后，考察脂质体用量较小，故所用磷脂胆固醇用量较小。磷脂用氯仿溶解配成10mg/ml的储备液，胆固醇为5mg/ml的氯仿储备液，储存时置于-20℃冰箱贮存。制备脂质体时，按照质量比磷脂/胆固醇=2：1，3：1 , 4:1 , 5:1 ，6:1 其中磷脂质量约为10mg,胆固醇为相应的质量，按照处方量取磷脂、胆固醇储备液加入50ml茄型瓶中，再加入3ml的氯仿，于37℃旋转蒸发成膜除氯仿，待茄型瓶中见不到明显氯仿液体的时候，再旋蒸30~60min 后 , 将水化温度升至50℃加入3ml的PBS水化，遇见的问题就出现了，根本水化不下来，后来改用稀释10倍的PBS和水水化也是相当困难，并且水化下来的脂质体溶液中有絮状的沉淀。望达人们路见不平一声吼，指出我的问的问题所在，谢谢大家！ PS: PBS的配方： NaCl 8 g KCl 0.2 g Na2HPO4.12H2O 2.9 g KH2PO4 0.2 g _________________________________________________ 加蒸馏水 1000ml [ Last edited by michaelzang on 2013-10-9 at 10:03 ] |
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