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RedE/T重组
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1、大肠菌有那么容易获得抗药性么?前两次没做阴性对照,电转入直链目的片段,培养两天之后(一个over night什么也长不出来)长出来的菌落用colony PCR检测结果好像转进去的片段都没有插到大肠菌的BAC里面去(按说就不应该有抗药性吧)。第三次加了阴性对照,结果过了三天,两个板子都长出东西来了。 2、用的电穿孔仪好像以前是买来电细胞的,而且摇菌的摇床最快只能开到300rpm(protocol要求1100),不知道这两点会不会导致实验失败。 |
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