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[交流]
RedE/T重组
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1、大肠菌有那么容易获得抗药性么？前两次没做阴性对照，电转入直链目的片段，培养两天之后（一个over night什么也长不出来）长出来的菌落用colony PCR检测结果好像转进去的片段都没有插到大肠菌的BAC里面去（按说就不应该有抗药性吧）。第三次加了阴性对照，结果过了三天，两个板子都长出东西来了。 2、用的电穿孔仪好像以前是买来电细胞的，而且摇菌的摇床最快只能开到300rpm（protocol要求1100），不知道这两点会不会导致实验失败。 |
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