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qianye325326

铜虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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5楼: Originally posted by lantianjesus at 2013-10-10 16:57:10
我改用了缓冲液体系,许多文献所报道的方法,可蛋白质含量还是高于吸附前的,我也试了试是不是吸附材料有干扰也没发现,会不会是因为摇床与离心作用过大,导致的呢?...

离心作用也有影响,过强的应激作用会造成蛋白变性,转速是多少呢,环境温度呢?
11楼2013-10-13 07:51:34
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lantianjesus

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by qlw4567 at 2013-10-11 18:27:40
BSA应该在278nm到280nm左右。怎么会到220呢?...

是的,放了一晚上,吸收峰又回来了,十分奇妙。。。。
标曲一般怎么做呢?
12楼2013-10-15 09:59:53
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lantianjesus

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by qianye325326 at 2013-10-13 07:48:46
做吸附之前扫过BSA没有?...

扫过,就是想知道吸附前BSA浓度。
再问一下,你们做标曲一般怎么做呢?我做了5,6次了,线性一直不好,BSA浓度控制在0-0.1mg/ml,0-1mg/ml都做过,怎么浓度范围越大呈指数形式。除了稀释不同倍数还有别的方法吗?
13楼2013-10-15 10:03:46
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lantianjesus

新虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by qianye325326 at 2013-10-13 07:50:03
有没有可能你的吸附材料会与蛋白发生反应,造成蛋白的变性?吸附动力学做过没有?...

以前没接触过,吸附动力学是指在不同吸附时间-吸附浓度的曲线吗?我打算这么做的,可是根本没有趋势,还出现了吸附前比吸附后浓度低的情况。标曲线性也很不好。。。
14楼2013-10-15 10:08:05
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lantianjesus

新虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by qianye325326 at 2013-10-13 07:51:34
离心作用也有影响,过强的应激作用会造成蛋白变性,转速是多少呢,环境温度呢?...

10000转,大于5分钟,室温
15楼2013-10-15 10:09:44
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jwh519

金虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我在做吸附时同样遇到了吸附后浓度变大的问题,吸附材料是自制的分子印迹聚合物,模板是天麻素,也在查找原因
16楼2013-10-15 15:56:58
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qianye325326

铜虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
13楼: Originally posted by lantianjesus at 2013-10-15 10:03:46
扫过,就是想知道吸附前BSA浓度。
再问一下,你们做标曲一般怎么做呢?我做了5,6次了,线性一直不好,BSA浓度控制在0-0.1mg/ml,0-1mg/ml都做过,怎么浓度范围越大呈指数形式。除了稀释不同倍数还有别的方法吗?...

用什么方法做的标曲?比色皿是否是石英的?
17楼2013-10-19 15:42:55
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lantianjesus

新虫 (小有名气)

引用回帖:
17楼: Originally posted by qianye325326 at 2013-10-19 15:42:55
用什么方法做的标曲?比色皿是否是石英的?...

比色皿是石英。
标曲就是自己配1mg/ml的BSA蛋白溶液,然后稀释不同倍数,测OD值。几乎为指数形式。
18楼2013-10-21 17:59:03
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liuzhini518

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
问题解决了吗?是什么原因呀,我最近也做吸附 蛋白质的实验,也出现了您的这种情况,请指教呀
19楼2013-12-09 09:36:47
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