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zhangjuan233金虫 (小有名气)
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【求助】 测量淀粉中直链淀粉的含量和大小么?
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请问怎么测量淀粉中直链淀粉的含量和大小么? 谢谢！ |
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fangyuan2004
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马铃薯直链淀粉标准品制备方法 (本标准等效采用国际标准ISO 6647：1987《稻米－直链淀粉含量的测定》) A1 仪器、设备 A1.1 组织捣碎机。 A1.2 筛：80目。 A1.3 离心机（4000r/min）。 A1.4 冰箱。 A1.5 磁力搅拌器。 A1.6 232型甘汞电极或具有相同性能的其他型号。 A1.7 213型铂电极或具有相同性能的其他型号。 A1.8 0～1.000V毫伏表。 A2 试剂 除注明外，均为分析纯，水为蒸馏水。 A2.1 氢氧化钠（GB 629）：0.5mol/L溶液。 A2.2 盐酸（GB 622）：1,1.5和2mol/L溶液。 A2.3 正丁醇（HG 3－1012）。 A2.4 异戊醇（ZBG 63001）。 A2.5 碘酸钾标准溶液：称取0.2140g碘酸钾（GB 651，优级纯），用水溶解后转入1000mL容量瓶中，用水定容，即1.00×10-4 mol/L。 A2.6 碘化钾溶液：称取66.40g碘化钾（GB 1272），用水稀释至1000mL，即0.4mol/L。 A3 制备方法 称取100g新鲜马铃薯，洗净，削皮，切块，放入组织捣碎机中，加水200mL，捣碎1min。过80目筛，并用水洗涤筛上物，弃去筛上物，沉淀，弃去上清液。 取沉淀物，加水200mL，再加入200mL 1mol/L氢氧化钠溶液，在85℃水浴上加热搅拌20min至完全分散，冷却，以4000r/min离心20min，取上清液用1.5mol/L盐酸溶液调至pH6.5，然后加入1：1(V/V)丁醇－异戊醇80mL，在85℃水浴中加热10min，冷却至室温，移入冰箱内（2～4℃），静置24h，去掉上层污物层，以4000r/min离心20min，弃去上清液，沉淀物即粗直链淀粉。 用饱和正丁醇水溶液洗涤沉淀物（粗直链淀粉），4000r/min离心15min，将沉淀物转入200mL饱和正丁醇水溶液中，在85℃水浴中加热溶解10～15min，冷却至室温，移入冰箱内（2～4℃），静置24h，弃去上层污物，以4000r/min离心10min，沉淀物再加200mL饱和正丁醇水溶液，在85℃水浴中加热溶解，反复纯3次。最后沉淀物用无水乙醇反复洗涤离心3～4次，分散于盘中2d，使残余乙醇挥发及水分达到平衡，即得直链淀粉标准品。 A4 标准品质量测定 A4.1 碘结合量测定 A4.1.1 测定 称取0.1000g标准品于100mL烧杯中，加入1.0mL无水乙醇湿润样品，再加入10mL0.5mol/L氢氧化钠溶液于85℃水浴中完全分散，冷却后移入100mL容量瓶中，用水洗烧杯数次，洗涤液一并移入容量瓶中，加水至刻度，摇匀。吸取5.0mL（含直链淀粉5mg）分散液放入200mL烧杯中，加入85mL水，5.0mL 1mol/L乙酸溶液及5.0mL 0.1mol/L碘化钾溶液，按电位滴定要求，将烧杯置于电磁搅拌器上，把铂电极及甘汞插入液面下，在电磁搅拌下，用2mL微量滴定管滴加碘酸钾标准溶液，每次滴加0.1mL（或0.05mL），1min后读取毫伏数，滴定终点用二次微商法计算。 A4.1.2 计算 基链淀粉碘结合量＝ 式中：m――直链淀粉质量，mg； Ｍ――直链淀粉水分含量，%； Ｖ――1.00×10-3 mol/L碘酸钾溶液滴定体积，mL； 0.7610――每毫升1.00×10-3 mol/L碘酸钾相当于碘的质量0.7610mg。 A4.2 碘－淀粉复合物吸收光谱测定 称取0.1000g标准品，称入100mL烧杯中，加入1.0mL无水乙醇湿润样品，再加入9.0mL1.0mol/L氢氧化钠溶液，在85℃水浴中完全分散，冷却后移入100mL容量瓶中，用水洗涤烧杯数次，一并移入容量瓶中，加水至刻度，定容。取定容液2.0mL于100mL容量瓶中，移取3.0mL0.09mol/L氢氧化钠溶液，加入50mL水稀释后，再加入1.0mL 1mol/L乙酸溶液和1.0mL碘试剂，加水定容至100mL，静置10min，用分光光度计测定500～800nm处的吸收光谱。 A4.3 淀粉含量测定 称取0.1000g标准品加入10mL 0.5mol/L氢氧化钠溶液，在85℃水浴中加热分散，再加入21.5mL 2mol/L盐酸溶液，在沸水浴中回流水解2h，用费林氏液法（见GB 5513）测定还原糖,乘以0.9系数，即得淀粉含量，计算标准品淀粉含量。 A4.4 马铃薯直链淀粉标准品标准 马铃薯直链淀粉标准品必须具备： a. 碘结合量在19%～20%之间。 b. λmax为640～650nm； c. 淀粉含量在85%以上。 |
2楼2007-12-01 09:30:01
weiweiqunshan
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