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草草乌龟

新虫 (初入文坛)

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[求助] 如何在细胞中提出脂肪酸

楼主是刚进研一的，领导现在让我构建一个不饱和脂肪酸的转基因载体转染细胞，过几天会要测细胞的不饱和脂肪酸含量有没有什么变化，看资料，一般方法是先从细胞中提取出脂肪酸，然后做气相或者液相色谱，但是对怎么从细胞中提取脂肪酸还是看不太懂，求前辈指教啊，越详细越好啊~

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考研尚未成功~

1楼 2013-10-01 10:43:07

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cg4455

铜虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

★
草草乌龟: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-10-02 11:35:04

可以参考一下！
①将细胞或者组织的混合物（<50ul）放入气象色谱样品处理玻璃瓶中，加入1ml正己烷(食用植物油的提取剂)。
②继续加入1ml含14%三氟化硼的甲醇溶液(现成试剂)。
③用氮气挤出玻璃瓶中的空气(2-3min)，密封，将玻璃瓶沸水浴100℃ 1小时，冷却到室温。
④冷却后的玻璃瓶中加入1ml的H2O混匀，1000rpm离心1分钟。
⑤将上层的正己烷吸出放入气象色谱上样瓶中，在氮气中浓缩(用氮气吹干)。加入600ul正己烷，等待上机。
——A simplified method for analysis of polyunsaturated fatty acids

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草草乌龟

努力工作！

2楼2013-10-02 09:29:55

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草草乌龟

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引用回帖:

2楼: Originally posted by cg4455 at 2013-10-02 09:29:55
可以参考一下！
①将细胞或者组织的混合物（<50ul）放入气象色谱样品处理玻璃瓶中，加入1ml正己烷(食用植物油的提取剂)。
②继续加入1ml含14%三氟化硼的甲醇溶液(现成试剂)。
③用氮气挤出玻璃瓶中的空气(2-3 ...

谢谢哈

，但是因为提取的是不饱和脂肪酸，那在这些操作之前是不是要加入一些保护剂防止不饱和脂肪酸被氧化的？一般加什么试剂，加多少，什么时候加？