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梦中梦-D

铜虫 (初入文坛)

[求助] 组培脱毒 已有2人参与

跪求高手指点,组培苗经多次继代培养后是否可以脱毒,怎样判定其体内是否带毒,材料是苹果组培苗,
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leeyaoting

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

首先要看你每次继代培养选取的材料,如果选取的是细胞团或者很小的幼胚,是很有可能脱毒的。检测可以采用酶联免疫试剂盒。
以农为本,达济天下
2楼2013-10-06 10:16:38
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today_312

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

多次培养不能证明已经脱毒。
脱毒一般是用根尖或者芽的生长点那一点点细胞,那部分细胞一般认为是无毒的。其他组织部分的细胞不敢说无毒。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2013-10-12 10:59:35
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deguohan

至尊木虫 (职业作家)

教授、博/硕导

【答案】应助回帖

多次多次继代不能证明是否脱毒。如果用根尖或者芽的生长点那一点点细胞,或者是悬浮的单个细胞培养出来的可以视为无毒。
天道酬勤,厚德载物
4楼2013-10-30 16:52:57
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deng神之刺客

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

脱毒苗多次继代后仍有可能重新染毒,楼主做的苹果组培,用茎尖继代时,选取材料大小应以下面标准为宜:
           茎原基                0.05-0.08 mm
       茎原基带2片叶原基     0.1  -0.2   mm
       茎原基带4片叶原基     0.3  -0.4   mm
       茎原基带6片叶原基     0.6  -0.8   mm
脱毒苗鉴定有多种方法:1、直接检测法
直接观察待测植株生长状态是否异常,茎叶上有无特定病毒引起的可见症状,从而可判断病毒是否存在。
2、植物指示法
利用病毒在其他植物上产生的枯斑作为鉴别病毒种类的方法,就是枯斑和空斑的测定法。
3、抗血清鉴定法
植物病毒是由蛋白质和核酸组成的核蛋白,因而是一种较好的抗原,给动物注射后会产生抗体,抗体存在于血清之中称抗血清。不同病毒产生的抗血清有各自的特异性。用已知抗血清可以鉴定未知病毒的种类。这种抗血清就是高度专一性的试剂,这种方法特异性高,测定速度快,一般几小时甚至几分钟就可以完成。所以抗血清法成为植物病毒鉴定中最有用的方法之一。
4、电镜检测法
用电镜直接观察经脱毒培养的叶片,检查是否有病毒质粒的存在,还可以测量病毒颗粒的大小、形状和结构。电镜鉴定法是一种既准确又科学的方法,但需要一定的设备和技术。
5、分子生物学鉴定法
核酸分子杂交、双链RNA法
通常几种方法联用效果更好
5楼2013-10-30 17:40:30
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梦中梦-D

铜虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by today_312 at 2013-10-12 10:59:35
多次培养不能证明已经脱毒。
脱毒一般是用根尖或者芽的生长点那一点点细胞,那部分细胞一般认为是无毒的。其他组织部分的细胞不敢说无毒。

是否用根尖或者芽的生长点培养液不保证是完全脱毒的?
6楼2013-11-01 14:52:23
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superchao897

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wanhscn: 金币+3, 鼓励应助回帖! 2013-12-31 16:13:57
不能。你在高温条件下组培两个月,切取生长点就可以脱除病毒!
7楼2013-12-30 21:01:26
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zlm3147

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

不可以,连续培养只是一种无性繁殖手段,通过热处理+茎尖培养可以脱毒,但是脱毒效果不好,现在脱毒效果好的方法是超低温液氮脱毒发,你可以查查相关文献看看
8楼2014-03-27 13:32:19
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