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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 其它 » 硅胶柱层析
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pla75100st

木虫 (小有名气)

[求助] 硅胶柱层析

RT，在做硅胶柱层析，原来实验室有一个小泵，现在买了一个功率大的，速度快了很多，但原来能分开的点现在会交叉，这是加压的问题吗？原来的速度是一滴一滴的，现在是一直流，还有就是怎么判断合适的压力？是不是流速是一滴一滴的最好？
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1楼 2013-09-25 16:56:24
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wendytxy

至尊木虫 (职业作家)

rosemary

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
pla75100st: 金币+2, 但是这样是不是太慢了？一般而言最快的速度应该是怎样的？ 2013-09-26 08:58:21
我认为肯定是加压的问题。本来硅胶柱层析的原理就是根据各组分对固定相和流动相的吸附能力不同达到分离的目的。lz加压的话，使本来被固定相也就是硅胶吸附的组分被流动相洗脱下来。尤其是lz描述的流速很快的现象，是做层析法的一个禁忌。一般情况下，流速为1滴每分钟适宜。
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床前明月光，猫猫爱喝汤。举头望主人，低头思猫粮。
2楼2013-09-25 17:22:04
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星辰流月

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
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pla75100st: 金币+2 2013-09-26 08:58:40
楼主的问题完全是加压了的原因，如果你想继续用加压泵，那么你只能把你的流动相极性变小，只有这样才会分开，但是同样也浪费溶剂。所以楼主还是一滴滴自然滴比较合算
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3楼2013-09-25 19:17:59
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pla75100st

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 星辰流月 at 2013-09-25 19:17:59
楼主的问题完全是加压了的原因，如果你想继续用加压泵，那么你只能把你的流动相极性变小，只有这样才会分开，但是同样也浪费溶剂。所以楼主还是一滴滴自然滴比较合算

这样啊。。。那速度岂不是太慢了
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4楼2013-09-26 08:59:00
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wendytxy

至尊木虫 (职业作家)

rosemary

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by wendytxy at 2013-09-25 17:22:04
我认为肯定是加压的问题。本来硅胶柱层析的原理就是根据各组分对固定相和流动相的吸附能力不同达到分离的目的。lz加压的话，使本来被固定相也就是硅胶吸附的组分被流动相洗脱下来。尤其是lz描述的流速很快的现象，是 ...

却是是慢了，但是做实验这事情就是不能着急。
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床前明月光，猫猫爱喝汤。举头望主人，低头思猫粮。
5楼2013-09-26 10:16:40
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pla75100st

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wendytxy at 2013-09-26 10:16:40
却是是慢了，但是做实验这事情就是不能着急。...

太慢的话，是不是会有扩散效应？我看化学那边一般就2到3小时过完一根柱子
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6楼2013-09-26 10:35:40
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wendytxy

至尊木虫 (职业作家)

rosemary

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by pla75100st at 2013-09-26 10:35:40
太慢的话，是不是会有扩散效应？我看化学那边一般就2到3小时过完一根柱子...

是会有扩散效应。但是你这样加压的话完全就是浪费时间，虽然速度快了，但是什么都没做出来。你自己也发现了，原来能分开的点分不开了，那么你为什么还要这么执迷不悟呢？层析柱有大有小，小的只有10厘米，左右，大的差不多1.5米，难道所有的柱子过的时间都一样吗？
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床前明月光，猫猫爱喝汤。举头望主人，低头思猫粮。
7楼2013-09-26 11:51:41
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小兰赵

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
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pla75100st: 金币+2 2013-09-26 15:49:35
选用粗的硅胶柱，不加压。也很快！而且效果很好
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8楼2013-09-26 14:23:18
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pla75100st

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wendytxy at 2013-09-26 11:51:41
是会有扩散效应。但是你这样加压的话完全就是浪费时间，虽然速度快了，但是什么都没做出来。你自己也发现了，原来能分开的点分不开了，那么你为什么还要这么执迷不悟呢？层析柱有大有小，小的只有10厘米，左右，大 ...

呵呵，谢了
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9楼2013-09-26 15:28:01
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pla75100st

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 小兰赵 at 2013-09-26 14:23:18
选用粗的硅胶柱，不加压。也很快！而且效果很好

用短粗的柱子？我一般用的是10cm到15cm，是越粗越好的吗？
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10楼2013-09-26 15:29:01
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