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木虫 (著名写手)

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★
louyiceng(金币-1,VIP+0):重复

你要根据你所需要分离的化合物的性质来选择不同的树脂填料。柱层析的作用原理一般分为分子筛和离子交换作用。比如说分离不同分子量的物质，可根据其分子的大小采用分子筛（大孔吸附树脂）的原理来分离，分离蛋白等带电荷的极性物质，就需要采用离子交换作用（离子交换树脂）来实现分离。然后，就是要选择洗脱液。可以采用不同的洗脱液来实现物质的分离。当然，选择洗脱液也是要根据所要分离的物质的溶解性质来选择。

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11楼2007-11-26 20:02:40

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ady

金虫 (正式写手)

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★
louyiceng(金币+1,VIP+0):hao

先TLC看看化合物极性情况，若是条件好，可将此条件移到干柱上进行分离，不过载样量较湿柱小。

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12楼2007-11-26 21:18:08

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hjj180057

金虫 (小有名气)

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★
louyiceng(金币+1,VIP+0):聚酰氨的柱子主要用分离黄酮

我也是研一的我也是搞这个的啊缘分啊
我师姐的柱子用的是改性的聚酰氨的柱子用的是水乙醇的混合洗液分离的是芹素柱子的填料还有洗脱液都有很大关系的你可以试试洗脱液改变一下看能有效果吗我也是菜鸟仅供参考

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13楼2007-11-26 21:37:47

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xueyezi

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暂别虫坛！考博去了！

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谢谢大家的帮忙!

我的问题是选好了展开剂之后,就直接用这种展开剂冲柱子吗?

还是先用小极性的淋洗剂(比如石油醚)冲洗一下?然后再慢慢的增加极性冲冼啊?我想和大家好好请教一下,我的QQ278048848,我会用一些金币答谢大家的!

感谢大家的热心帮助!

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14楼2007-11-26 21:57:08

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匿名

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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！
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15楼2007-11-26 23:08:30

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xueyezi

荣誉版主 (著名写手)

暂别虫坛！考博去了！

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谢谢大牛trywpl的帮助!

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16楼2007-11-27 12:34:00

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风过留痕

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可能是填料没填好，样品没挂住。
还有就是可能洗脱液的极性选太大了，一般的Rf=0.2~0.3之间的洗脱液。

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17楼2007-11-27 12:44:26

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yuanxinyue2007

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★
louyiceng(金币+1,VIP+0):xiexie

这里有一些关于展开剂的资料，不知道对你有没有帮助。
聚酰胺特别适应于多元酚类化合物的分离，如黄酮、醌类、酚酸、含羰基化合物、羧基化合物等。
对于你遇到的问题，个人以为，可能是洗脱溶剂没有选择好，再就是所用的聚酰胺粒度较大。建议你换用目数更大的材料，并且更换洗脱剂。先用含水较多的系统洗脱，因为含水多，氢键吸附强烈，洗脱就慢些。
含水系统是与分离各种苷类、糖、有机酸类等水溶性成份，以及黄酮苷类与黄酮苷元的分离、黄酮类与水溶性脂肪族的成份。含水系统增加有机溶剂的比例能提高洗脱能力，极性小的溶剂适于萜类、甾体、黄酮苷元、酚类、醌类等极性不大的成分的分离；加入大极性溶剂会使上述成分加快洗脱。
常用的洗脱溶剂系统：
黄酮苷类：甲醇-乙酸-水90：5：5；甲醇-水4：1；乙醇-水1：1；丙酮-水1：1；异丙醇-水3：2；乙酸乙酯-乙醇3：2；氯仿-甲醇7：3；正丁醇-乙醇-水1：4：5；
黄酮苷元：氯仿-甲醇96：4；氯仿-甲醇-丁酮12：2：1；氯仿-甲醇-甲酸60：38：2；氯仿-甲醇-吡啶70：22：8；氯仿-甲醇-苯酚64：28：8；
醌类：10%醋酸；石油醚-苯-醋酸2：2：1；
酚类：丙酮-水1：1；环己烷-乙酸93：7；10%醋酸；
糖类：乙酸乙酯-甲醇8：1；正丁醇-丙酮-水-醋酸6：2：1：1；
生物碱：水-甲醇-乙二胺88：12：0.1；环己烷-乙酸乙酯-正丙醇-二甲胺30：2.5：0.9：0.1；
甾体及萜类：正己烷：丙酮4：1；氯仿-丙酮4：1；
甾体苷：甲醇-水-甲酸60：35：5；乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸50：20：25：5

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18楼2007-11-27 15:50:28

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