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395526304

铜虫 (小有名气)

[求助] 酶联免疫 花生过敏原双抗夹心 消除基质影响

我做的实验是 花生过敏原酶联免疫方法的建立
方法双抗夹心 包被兔抗 花生蛋白浓度4ppm开始,1.5倍梯度,检测抗体是鼠抗,检测限LOD为50ppb。 现在在做添加回收,基质是 牛奶、面包、饼干。1g基质加入5mlpbs ,再分别添加200ppb、500ppb、1ppm。10000转离心20min,过0.45的水膜,然后加样。 回收率=实际值/添加值。 添加200ppb的回收率200%,500ppb回收率1000%,1ppm回收率2000%,基质影响很大。 我们要求回收率在80-120%。 请问如何消除基质影响。 有人告诉我,用75%酒精沉淀蛋白后再添加,可是具体操作我也不会,求指导,谢谢。
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