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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 十万火急，小弟实验室的PC12细胞最近总是被污染（有图），求解救办法
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紫拙

木虫 (正式写手)

[求助] 十万火急，小弟实验室的PC12细胞最近总是被污染（有图），求解救办法 已有3人参与

小弟养PC12细胞快一年了，原本十分好养的，但最近几个月里面细胞培养基很容易长其他东西，感觉有细菌又有真菌：培养基发黄，而且很浑浊，里面有漂浮着的成串的球状菌，刚开始球装菌较少，用PBS也洗不干净，后来越来越多，十二小时内培养基颜色变黄，细胞数目不断减少，在肉眼下观察，可以看到培养基表面有白色漂浮物，加了抗生素也没有作用（实验室用的是1640培养基，5%马血清和10%胎牛血清），传到三四代左右就长菌，而且细胞生长很慢，实验室的培养基验过菌，空培养基放两个礼拜也没有染菌，应该没问题啊
     附上图片，请各位大侠告诉我这是什么菌，怎么样去除以及如何避免，在下感激不尽！！！
     （圆圈内是长的球状物，箭头是PC12细胞）
十万火急，小弟实验室的PC12细胞最近总是被污染（有图），求解救办法
IMG_20130911_094702.jpg


十万火急，小弟实验室的PC12细胞最近总是被污染（有图），求解救办法-1
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十万火急，小弟实验室的PC12细胞最近总是被污染（有图），求解救办法-2
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十万火急，小弟实验室的PC12细胞最近总是被污染（有图），求解救办法-3
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十万火急，小弟实验室的PC12细胞最近总是被污染（有图），求解救办法-4
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及锋而试一行幽径，乘清风以共明月，九华苍穹，沥北斗而见天权
1楼 2013-09-13 00:01:04
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

mada1986

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-13 08:24:21
用的所有器械和试剂换新的或者重新灭菌，培养箱甲醛处理，祝你好运
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3楼2013-09-13 08:08:06
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小小苦瓜脸

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

亲，你上的图是真菌还是细菌的？
另外你是做了处理细胞长好了还是直接扔掉重新来的？
不好意思，真是和你一模一样才问你问得这么着急。
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记得那时年纪小，你爱谈天我爱笑
13楼2015-02-12 21:19:59
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普通回帖

紫拙

木虫 (正式写手)
别沉啊
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及锋而试一行幽径，乘清风以共明月，九华苍穹，沥北斗而见天权
2楼2013-09-13 00:09:24
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紫拙

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by mada1986 at 2013-09-13 08:08:06
用的所有器械和试剂换新的或者重新灭菌，培养箱甲醛处理，祝你好运

谢谢啊，但能不能知道这是什么污染呢
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及锋而试一行幽径，乘清风以共明月，九华苍穹，沥北斗而见天权
4楼2013-09-19 22:47:58
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dingchui

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

只能是在灭菌和操作过程中多注意些，培养基配制的时候一定要注意细节，而且要验菌，任何一步不小心都会前功尽弃。我们用DMEM培养基
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5楼2014-03-28 21:53:30
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紫拙

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by dingchui at 2014-03-28 21:53:30
只能是在灭菌和操作过程中多注意些，培养基配制的时候一定要注意细节，而且要验菌，任何一步不小心都会前功尽弃。我们用DMEM培养基

其他的都没问题 估计是细胞本身的原因  谢谢了
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及锋而试一行幽径，乘清风以共明月，九华苍穹，沥北斗而见天权
6楼2014-07-06 22:13:55
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小小苦瓜脸

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

请问问题解决了吗
方便的话能不能给我个电话我问问你
我们情况一模一样，我也不知道是怎么回事，麻烦你了
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记得那时年纪小，你爱谈天我爱笑
7楼2015-02-10 22:05:04
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紫拙

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 小小苦瓜脸 at 2015-02-10 22:05:04
请问问题解决了吗
方便的话能不能给我个电话我问问你
我们情况一模一样，我也不知道是怎么回事，麻烦你了

我的解决了 细胞和培养基 血清全部换新的，有问题可以再联系
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及锋而试一行幽径，乘清风以共明月，九华苍穹，沥北斗而见天权
8楼2015-02-11 16:24:27
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小小苦瓜脸

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 紫拙 at 2015-02-11 16:24:27
我的解决了 细胞和培养基 血清全部换新的，有问题可以再联系...

可以给个电话吗
我想问问你，我已经染过2次了，买的悬浮的PC12原代细胞，也找不到原因。
这是细菌还是真菌啊？
这个细胞好养不？
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记得那时年纪小，你爱谈天我爱笑
9楼2015-02-11 17:26:05
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yanghuaizu

新虫 (初入文坛)
诶  我也染了好几次
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10楼2015-02-11 21:41:34
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