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fangfeng1979

至尊木虫 (正式写手)

[交流] 请教:HPLC指纹图谱内标物怎么选择才算合适?

《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》:“制定指纹图谱必须设立参照物,应根据供试品中所含成分的性质,选择适宜的对照品作为参照物,如果没有适宜的对照品,可选择适宜的内标物作为参照物。参照物的制备应根据检测方法的需要,选择适宜的方法进行。”
  我现在做的一个品种因为没有对照品,只得选择内标物,想请教各位虫子:适宜的内标物的具体要求是什么呢?应该是对样品中的峰没有干扰,还有其他的要求吗?
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yzb1976110

铜虫 (小有名气)

HPLC指纹图谱内标物怎么选择才算合适?,我也为这事苦恼啊,搞定没有啊,搞定啦,请发一个给我好吗?谢谢!
yzb1976110@sohu.com
2楼2007-12-19 23:34:06
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278302519a

金虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供!
谨供参考:

⑴.内标物与被分析物质的物理化学性质要相似(如:沸点、极性、化学结构等);

    ⑵.内标物应能完全溶解于被测样品(或溶剂)中,且不与被测样品起化学反应;

    ⑶.内标物的出峰位置应该与被分析物质的出峰位置相近,且又不共溢出,目的是为了避免GC的不稳定性所造成的灵敏度的差异;

    ⑷.选择合适的内标物加入量,使得内标物和被分析物质二者峰面积的匹配性大于75%,以免由于它们处在不同响应值区域而导致的灵敏度偏差。

(5)内标物的校正因子与被测组分的校正因子相近.
(6)加入内标的量要接近被测组分含量,称量时要准确。
3楼2008-02-19 15:45:29
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karl2100

至尊木虫 (著名写手)

个人觉得,应该是从您的药材所有峰中选择一或一个以上的,能与其他峰有好的分离度,峰面积不太小的(在整个图谱中明显的)化合物单质峰。

[ Last edited by karl2100 on 2008-2-19 at 21:43 ]
4楼2008-02-19 21:41:21
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