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farmer2013

新虫 (初入文坛)


[交流] 一步法的gateway植物表达载体

有没有一步法的就能构建的Gateway植物超量表达载体?

实验室前人都需要利用一个带attP位点的入门克隆载体,通过BP和LR两部反应,将目的基因装载到带attR位点的植物超量表达载体上。

但现在本人要构建大量的植物超量表达载体,想简化程序,直接将带attB位点的PCR产物装到带attP位点的植物超量表达载体上。

大家建议一下有什么好用的、带attP位点的、Gateway的、植物的、超量表达载体?

最好是能购买到的商业载体,成功应用的个人改造的载体,只要方便弄到也行。
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starseacow

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我们组有这种载体。但目前已发表可以提供的只有基于UBQ10的一些瞬时及稳定表达载体,具体信息见如下文章,如果有需要可以联系订购(http://www.psrg.org.uk/resources.html)。
Grefen,C., Donald,N., Hashimoto,K., Kudla,J., Schumacher,K., and Blatt,M.R. (2010) "A ubiquitin-10 promoter-based vector set for fluorescent protein tagging facilitates temporal stability and native protein distribution in transient and stable expression studies." Plant J. 64: 355-65
Chen,Z.H., Grefen,C., Donald,N., Hills,A., and Blatt,M.R. (2011) A bicistronic, Ubiquitin-10 promoter-based vector cassette for transient transformation and functional analysis of membrane transport. Plant Cell and Environment, 34:554-564.
4楼2013-09-20 22:35:22
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spth2o

金虫 (小有名气)


这样做应该是可行的,但是目前好像没有这样的商业化载体,只能够自己改造了。
3楼2013-09-20 16:36:47
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