| 查看: 2384 | 回复: 27 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
nihaotianjia金虫 (小有名气)
|
[求助]
胶体金连成dimer
|
||
| 想问下胶体金如何连成dimer？具体方法~~谢谢 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 reviews paper |
» 猜你喜欢
非晶合金
已经有2人回复
-
院士团队-每届学生都优秀-高自由度-团队氛围好
已经有0人回复
-
无机化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有105人回复
-
求调剂
已经有3人回复
-
化工学院（学院正式调剂群+联系方式）
已经有0人回复
-
化工学院（学院官方群）-院士团队招生-学生自由度高-培养模式成熟高效
已经有0人回复
-
黑龙江大学分析化学招调剂
已经有0人回复
-
武汉高校国家级人才团队招收材料，化学，纺织等专业硕士调剂生
已经有26人回复
-
纺大化工学院（官方群）-院士团队招生-学生自由度高发展好-培养模式成熟
已经有0人回复
-
温州大学化材学院王娟课题组招生
已经有5人回复
-
学院官方群-院士团队招生-学生自由度高-培养模式成熟已有10余名学生赴985海外深造
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 哪种有机物可以将胶体金连成二聚体
已经有2人回复
zhenwuhuang
至尊木虫 (文学泰斗)
- 应助: 4351 (副教授)
- 金币: 10179.3
- 散金: 1
- 红花: 137
- 帖子: 65926
- 在线: 2433.9小时
- 虫号: 2227382
- 注册: 2013-01-07
- 性别: GG
- 专业: 人类营养
5楼2013-09-09 18:09:49
Abner若谷
金虫 (职业作家)
长大了的小朋友
- 应助: 22 (小学生)
- 金币: 5264.8
- 散金: 6950
- 红花: 145
- 沙发: 1
- 帖子: 4157
- 在线: 436.4小时
- 虫号: 2000394
- 注册: 2012-09-14
- 性别: GG
- 专业: 无机非金属基复合材料
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
（一）胶体金的制备 1．制备方法胶体金的制备多采用还原法。氯金酸（HauC14）是主要还原材料，常用还原剂有柠檬酸钠、鞣酸、抗坏血酸、白磷、硼氢化钠等。根据还原剂 类型以及还原作用的强弱，可以制备0.8nm～150nm不等的胶体金。 最常用的制备方法为柠檬酸盐还原法。 具体操作方法如下： （1）将HauC14先配制成0.01％水溶液，取100ml加热至沸。 （2）搅动下准确加入一定量的1％柠檬酸三钠（Na3C6H5O7·2H2O）水溶液。 （3）继续加热煮沸15min。此时可观察到淡黄色的氯金酸水溶液在柠檬酸钠加入后很快变灰色，续而转成黑色，随后逐渐稳定成红色。全过程约2～3min。 （4）冷却至室温后用蒸馏水恢复至原体积。 用此法可制备16～147nm粒径的胶体金。金颗粒的大小取决于制备时加入的柠檬酸三钠的量。 （二）免疫金的制备 1．用0.2mol/LK2CO3或0.1mol/LHC1调节胶体金溶液的pH至选定值。原则上可选择待标记蛋白质等电点，也可略为偏碱。但通常最适反应pH往往需经多次试验才能确定。 在调节胶体金的pH值时应注意，胶体金会阻塞pH计的电极，不可直接将电极插入胶体金溶液中，宜先用终浓度为0.15的聚乙二醇（PEG，20000）稳定胶体金后，再胶体金的pH值。 2．将1/10体积的合适浓度的蛋白质溶液加于胶体金溶液中，放置室温反应2～5min。 由于盐类成分能影响胶体金对蛋白质的吸附，并可使胶体金聚沉，因此待标记蛋白质溶液若含有较高的离子浓度，应在标记前先对低离子强度的蒸馏水透析去盐。 3．加入浓度为0.2％的PEG或BSA以饱和游离的胶体金。 4．离心分离，去除上清液中未结合的蛋白质。离心条件视胶体金颗粒的粒径而异：对5nm金颗粒可选用40000r/min离心1h；8nm金颗粒用25000r/min离心45min；14nm金颗粒用25000r/min离心30min，40nm金颗粒用15000r/min离心30min。 5．轻吸上清液。沉淀用含PEG或BSA的缓冲液悬浮，恢复原体积后再离心。如此洗涤2～4次。以彻底除去未结合的蛋白质。 6．免疫金复合物最终用稀释液配制成工作浓度保存。稀释液通常是加入稳定剂的缓冲液。缓冲溶液常用中性的PBS或Tris缓冲液。 多种蛋白质、葡聚糖、PEG2000、明胶等均为良好的高分子稳定剂，PEG和BSA是最常用的稳定剂。稳定剂有两大作用：一为保护胶体金的稳定性，使之便于长期保存；二为防止或减少免疫金复合物的非特异性吸附反应。稳定剂的合理选择是十分重要的，不适当的稳定剂有时也会导致非特异性反应。 |
2楼2013-09-09 17:35:36
zhenwuhuang
至尊木虫 (文学泰斗)
- 应助: 4351 (副教授)
- 金币: 10179.3
- 散金: 1
- 红花: 137
- 帖子: 65926
- 在线: 2433.9小时
- 虫号: 2227382
- 注册: 2013-01-07
- 性别: GG
- 专业: 人类营养
3楼2013-09-09 18:00:22
zhenwuhuang
至尊木虫 (文学泰斗)
- 应助: 4351 (副教授)
- 金币: 10179.3
- 散金: 1
- 红花: 137
- 帖子: 65926
- 在线: 2433.9小时
- 虫号: 2227382
- 注册: 2013-01-07
- 性别: GG
- 专业: 人类营养
4楼2013-09-09 18:05:16
