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待雁归来

金虫 (初入文坛)

[交流] 多重PCR 已有1人参与

各位虫友,小弟最近在用三个引物PCR时,理论上应该有两条相差100bp的条带,但是怎么总是出现一条带清晰,另一条带模糊不清的状况?我三个引物加的量是一样的,一个上游引物,两个下游引物,并且加了与引物量相同的DMSO
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为挽救他人生命而努力
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zhouking8758

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
每个PCR产物大小是多少?一定长度范围内相差100bp的两条带通过跑胶是分不开的。
2楼2013-09-08 22:37:29
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zhouking8758

木虫 (正式写手)

另外,你做单独的PCR,每个产物的条带都能清晰P出来么?
如果能,看看不同引物之间在模版上是否有错配,引物之间是否能形成二聚体等高级结构,以及引物之间的退火温度相差是否大?
3楼2013-09-08 22:39:08
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