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a6379137

木虫 (小有名气)

[求助] Hela传代时,细胞能贴壁,但是生长缓慢,大概是哪出了问题?

最近在学养Hela,前几次传代都挺好的,不到两天就能长满,但是最近传代的时候总是长得很慢,细胞贴壁了,但是没变形,还是比较接近圆形,一天半基本没长多少?
我推测可能出问题的地方有这么几点:1.培养瓶泡酸用的酸液不好用了;2.血清或培养基出了问题;3.支原体还是什么的感染了,;4可能是胰酶消化过了?
大概是哪出了问题呢?
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pypsak

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
137167741: 金币+1, 鼓励交流~~ 2013-09-10 18:59:19
怎么这么像支原体污染的……
4楼2013-09-09 16:14:20
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minikara

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
137167741: 金币+2, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-09-10 18:59:03
Hela细胞很好养的,一天半了细胞还是接近圆形,要么是铁壁不牢,细胞未完全展开,要么就是受损失,严重得导致细胞形态都发生了变化,所以你的思路很正确,从培养瓶是否干净和操作(特别是消化和吹打)去考虑。
2楼2013-09-09 15:11:47
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virologik

至尊木虫 (文坛精英)

神马

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
137167741: 金币+2, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-09-10 18:59:10
注意培养液的PH值,太碱了,就会出现楼主描述的情况,把PH值调到6.5左右,用HEPES稳定,试试看,细胞会展开,且长得很快的。当然必须先排除污染
喂饱了神马,赶走了浮云!继续给力!
3楼2013-09-09 15:33:03
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webrother

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-09-12 07:37:07
Hela很容易贴壁的,原因可能为:1、你的培基加血清过少;2、冻存细胞的程序不对导致细胞大量死亡,没有活细胞复苏时就无法贴壁;3、培养箱的温度可能出现异常
发扬钉子精神
5楼2013-09-10 23:44:11
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