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乐乐王

铁虫 (小有名气)

[求助] RACE

克基因，已拿到中间片段，设计3‘和5’RACE引物时误以中间片段的反向互补序列为模板设计了引物，请问还能做下去吗？在线等，谢谢
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RACE

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1楼 2013-09-06 00:19:33
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grape_vine

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-09-06 11:54:10
当然可以阿, 这种情况下应该是5'当3'用, 3'当5'用!应该没问题!
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2楼2013-09-06 09:56:28
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乐乐王

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by grape_vine at 2013-09-06 09:56:28
当然可以阿, 这种情况下应该是5'当3'用, 3'当5'用!应该没问题!

5'的两个引物（外侧引物和内侧引物）当3‘用时，是先用内侧引物还是先用外侧引物，3’的两个引物呢？望不吝赐教
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3楼2013-09-06 21:31:36
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by 乐乐王 at 2013-09-06 14:31:36
5'的两个引物（外侧引物和内侧引物）当3‘用时，是先用内侧引物还是先用外侧引物，3’的两个引物呢？望不吝赐教...

哪个引物的位置更靠近扩增目标区域哪个引物就是内侧.
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4楼2013-09-06 21:51:06
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grape_vine

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-09-08 20:58:38
引用回帖:
4楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-09-06 21:51:06
哪个引物的位置更靠近扩增目标区域哪个引物就是内侧....

同意!
你要是还弄不明白的话, 就画个图,只要把序列正反链都画出来, 引物的位置和5'-3'的方向标明白,相信你就清楚了.
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5楼2013-09-08 20:49:33
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54808455

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用DNAman或其他软件，用这四条引物，在原来的中间片段查找，就知道了。
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6楼2013-09-08 21:00:03
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