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rexors

至尊木虫 (小有名气)

[求助] 求助“酶纯化后冻干粉末蛋白含量”的问题

盐析后做的离子交换层析,
透析冻干后,用考马斯亮蓝G250测蛋白含量
1mg冻干酶粉(含水也就30%左右)中蛋白才0.1~0.2mg,

离子交换也没引入什么新的杂质,只是又去除了一些杂蛋白,
但是为什么冻干后蛋白含量这么低?想要测这些非蛋白类的是什么用什么检测手段?质谱可以吗?
望大家指正~~
我的旅途上的同伴,終竟是尋不着的了-------我是一個十足的零餘者
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rexors

至尊木虫 (小有名气)

这个结果是透析之后的结果,小分子不可能吧
大分子??离子交换除不掉吗?离子交换只是保留了某部分等电点相近的物质~~那些杂质会随着酶一起留下来?
我的旅途上的同伴,終竟是尋不着的了-------我是一個十足的零餘者
3楼2007-11-19 11:44:01
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ouyangbaishui

银虫 (小有名气)

呵呵,支持下.从你的结果看来,酶蛋白含量很低,而且还含有杂蛋白.故必须先弄明白引进的可能杂质成分.然后有针对性的去除杂质.如果是小分子杂质,可以用透析除去.如果是大分子杂质,可考虑用电泳除去.希望我的建议能帮上的忙.
愿做一只小小的木虫,钻入科学的心脏里面去,哈哈
2楼2007-11-19 11:34:30
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