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懒汉不懒

金虫 (小有名气)

[求助] 关于耐药株细胞

最近想构建一株耐药株细胞，细胞加入药物后，然后换未加药物的培养液，细胞好像停止生长了，即使传代几次好像也没有增殖，这是什么原因？该怎么处理是好？
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1楼 2013-09-03 14:50:53
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sujing2013

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+10, 回答的很专业！ 2013-10-18 02:30:21
经验建议不要自己构建所谓耐药株细胞。
1. 耗时长，困难大，不稳定；
2.发文章的时候，模型不容易被认可；
3.即使建立成功，这种细胞株也不好生长，需要长时间低剂量化疗药物刺激，容易产生各种变异。
综上，换个思路吧！或者买所谓商品化的细胞株代替。
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2楼2013-10-17 15:41:46
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黑盖儿

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-18 02:30:30
耐药株不是加入药物就能构建好的，这需要一个药物浓度从低到高的梯度，并且一旦环境中没有了药物胁迫，很容易丢失抗性。
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我给不了你宝马香车，锦衣玉食，但我会用一辈子去疼你，爱你，保护你
3楼2013-10-17 18:53:12
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懒汉不懒

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sujing2013 at 2013-10-17 15:41:46
经验建议不要自己构建所谓耐药株细胞。
1. 耗时长，困难大，不稳定；
2.发文章的时候，模型不容易被认可；
3.即使建立成功，这种细胞株也不好生长，需要长时间低剂量化疗药物刺激，容易产生各种变异。
综上，换 ...

多谢，感觉是挺难构建的，低剂量处理后细胞也是停止增殖了
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4楼2013-10-18 08:24:46
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懒汉不懒

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 黑盖儿 at 2013-10-17 18:53:12
耐药株不是加入药物就能构建好的，这需要一个药物浓度从低到高的梯度，并且一旦环境中没有了药物胁迫，很容易丢失抗性。

请问你有什么好方法吗？
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5楼2013-10-18 08:25:22
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黑盖儿

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这个我也没有。个人觉得你要是不知道耐药基因序列的话，那就只能配置药物浓度梯度，然后层层筛选；要是知道基因序列，不妨试一试基因工程的方法，不过基因工程的方法也不是太简单，并且基因工程菌对培养条件的要求比较严格，限制了产业化应用。一般来说，要保持细菌的耐药性，就要在环境中保持药物胁迫。
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我给不了你宝马香车，锦衣玉食，但我会用一辈子去疼你，爱你，保护你
6楼2013-10-19 07:49:22
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懒汉不懒

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 黑盖儿 at 2013-10-19 07:49:22
这个我也没有。个人觉得你要是不知道耐药基因序列的话，那就只能配置药物浓度梯度，然后层层筛选；要是知道基因序列，不妨试一试基因工程的方法，不过基因工程的方法也不是太简单，并且基因工程菌对培养条件的要求比 ...

确实挺难构建的，低浓度给药几次，细胞感觉就不分裂了。真是光有理论也不行呀
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7楼2013-10-19 10:42:21
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