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懒汉不懒

金虫 (小有名气)

[求助] 关于耐药株细胞

最近想构建一株耐药株细胞,细胞加入药物后,然后换未加药物的培养液,细胞好像停止生长了,即使传代几次好像也没有增殖,这是什么原因?该怎么处理是好?
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sujing2013

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+10, 回答的很专业! 2013-10-18 02:30:21
经验建议不要自己构建所谓耐药株细胞。
1. 耗时长,困难大,不稳定;
2.发文章的时候,模型不容易被认可;
3.即使建立成功,这种细胞株也不好生长,需要长时间低剂量化疗药物刺激,容易产生各种变异。
综上,换个思路吧!或者买所谓商品化的细胞株代替。
2楼2013-10-17 15:41:46
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黑盖儿

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-18 02:30:30
耐药株不是加入药物就能构建好的,这需要一个药物浓度从低到高的梯度,并且一旦环境中没有了药物胁迫,很容易丢失抗性。
我给不了你宝马香车,锦衣玉食,但我会用一辈子去疼你,爱你,保护你
3楼2013-10-17 18:53:12
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懒汉不懒

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sujing2013 at 2013-10-17 15:41:46
经验建议不要自己构建所谓耐药株细胞。
1. 耗时长,困难大,不稳定;
2.发文章的时候,模型不容易被认可;
3.即使建立成功,这种细胞株也不好生长,需要长时间低剂量化疗药物刺激,容易产生各种变异。
综上,换 ...

多谢,感觉是挺难构建的,低剂量处理后细胞也是停止增殖了
4楼2013-10-18 08:24:46
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懒汉不懒

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 黑盖儿 at 2013-10-17 18:53:12
耐药株不是加入药物就能构建好的,这需要一个药物浓度从低到高的梯度,并且一旦环境中没有了药物胁迫,很容易丢失抗性。

请问你有什么好方法吗?
5楼2013-10-18 08:25:22
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黑盖儿

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这个我也没有。个人觉得你要是不知道耐药基因序列的话,那就只能配置药物浓度梯度,然后层层筛选;要是知道基因序列,不妨试一试基因工程的方法,不过基因工程的方法也不是太简单,并且基因工程菌对培养条件的要求比较严格,限制了产业化应用。一般来说,要保持细菌的耐药性,就要在环境中保持药物胁迫。
我给不了你宝马香车,锦衣玉食,但我会用一辈子去疼你,爱你,保护你
6楼2013-10-19 07:49:22
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懒汉不懒

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 黑盖儿 at 2013-10-19 07:49:22
这个我也没有。个人觉得你要是不知道耐药基因序列的话,那就只能配置药物浓度梯度,然后层层筛选;要是知道基因序列,不妨试一试基因工程的方法,不过基因工程的方法也不是太简单,并且基因工程菌对培养条件的要求比 ...

确实挺难构建的,低浓度给药几次,细胞感觉就不分裂了。真是光有理论也不行呀
7楼2013-10-19 10:42:21
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