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514278815

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-04 20:52:45
是不是试剂盒有问题呀?下面的弥散带可能是基因组破坏产生的。建议你用试剂盒提一下别的基因组试一试?如果正常,可能是操作的问题,你可以换个人试试做下。
11楼2013-09-03 11:40:05
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yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-09-04 20:52:57
同一种材料的DNA?DNA有些降解的话,不同材料下部不应该都是齐刷刷的都是如此。感觉是你的的试剂或者加样问题。
学习使你立于不败之地
12楼2013-09-03 11:46:02
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dehong1573

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-04 20:53:05
引用回帖:
9楼: Originally posted by rubie at 2013-09-03 11:07:37
亲,有没有什么好的方法啊?我已进行了RNA污染和蛋白质污染排查,发现都不是这种现象。。。。我提出来的DNA全部都是这个样子呀...

没抽过土壤的,没有什么确切的建议,像其他人说的,你得先排除跑胶的可能,用新鲜的缓冲液,胶不要存放;
如果还是这样,确实是降解了,你的查下相关文献,看别人是怎么处理的,或者联系试剂盒的客服,向他们请教;
如果还不行就得换盒子了!
科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
13楼2013-09-03 14:21:21
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by rubie at 2013-09-03 11:12:58
大牛,你能否给学生一点建议?我昨天进行了RNA(加RNA酶)和蛋白质污染(将生工试剂盒从加入蛋白沉淀液的过程走了一遍)排查,觉得这两种污染都不是的。由于我提出来的DNA基本都是这种现象,不知道该如何解决,确实 ...

我觉得你接着做就行了,做qPCR的模板用量非常少,即使有少量杂质应该问什么问题。
14楼2013-09-04 02:01:32
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清雅风

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-04 20:53:13
这种斜着的图像时因为没有把胶放正,胶在电泳槽中移动了
朝着自己的理想奔跑,就是幸福!
15楼2013-09-04 20:11:41
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chenzhixi

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也觉得是胶和跑电泳的问题,要不就是胶没制好,要不就是跑的过程中在电泳槽有移动,要不就是电压不稳
16楼2013-09-05 09:22:29
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rubie

银虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-09-04 02:01:32
我觉得你接着做就行了,做qPCR的模板用量非常少,即使有少量杂质应该问什么问题。...

用这种DNA做定量好像的确可以做,但是定量出现的问题就不知道是不是因为这个杂质的问题了。因为后面还要提土壤中的DNA,我担心还是会这个样子,不知您有没有什么好的建议与想法?求指教。。。。电泳液和胶的问题我也排查过了。。。。
just do it
17楼2013-09-08 16:00:29
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hl16010921

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

LZ是不是样品的粘度特别大或胶配的有问题,另外检查电泳缓冲溶液和电泳槽电极,铂丝。感觉像样品中含多糖或蛋白杂质,粘度特别大。也可能是离子强度不对,土壤样品的除盐不充分?稀释上样试试。
18楼2013-09-10 09:10:05
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