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wlwsj2009

银虫 (小有名气)

[交流] RT-PCR 已有2人参与

各位老师,我做RT-PCR的时候,(病毒种植在细胞培养液中)从细胞中提取的总RNA条带很清楚,18S,28S,但是逆转录后PCR总是跑的条带很弥散,是怎么回事?请教各位老师!谢谢!
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Sthunder

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-08-31 09:34:11
弥散原因很多,比如反转录效率,引物特异性,退火温度等。你内参基因跑得如何呢?如果内参跑得很好,那么多半是引物or退火温度的问题。Good luck!
互助互励,共奋共进!!
2楼2013-08-31 09:03:08
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幽魂银龙

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
难道不该是弥散的吗?你用的什么引物反转的
3楼2013-09-01 17:26:10
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wlwsj2009

银虫 (小有名气)

谢谢,问题正在解决中!
4楼2013-09-01 20:04:15
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