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lddd85

[交流] 求助 紫外分光

前天做标准曲线,是用紫外分光,可是测出来的数据不是很规则,忽高忽低,后来重新配溶液,再测一次,更搞笑,标准曲线的吸光度竟然是负值,但是样品溶液测的结果都没问题,可郁闷了,想了半天也不知道什么原因。高手们能否指点一下!!
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实验室歌神

金虫 (著名写手)

先说一下你测得是什么物质,然后用什么方法测的。
这样才好具体的分析。
2楼2007-11-17 11:27:18
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lddd85

哦,测的是多糖,用的是苯酚-浓硫酸法
3楼2007-11-17 12:20:04
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gangstcm

铜虫 (初入文坛)

我也测过多糖,用的是蒽酮-浓酸法,结果很好。是不是你没有做好空白呀,还是仪器没有校正好,再检查一下。
4楼2007-11-17 13:16:38
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gangstcm

铜虫 (初入文坛)

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我也测过多糖,用的是蒽酮-浓酸法,结果很好。是不是你没有做好空白呀,还是仪器没有校正好,再检查一下。
5楼2007-11-17 13:17:35
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cl161

木虫 (正式写手)


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供!
同样经历,呵呵呵,我自己认为可能的原因如下:
1.可能是检测器或者灯出现问题。当然490nm应该干扰较少。
2.石英皿是否不配对导致的,最好每次测试时都是同一个光面对着进光处。
3.空白液配制时出现问题,导致不平行。
4.石英皿的光面有液体,没有擦干净。
5.吸收池没关严。
6楼2007-11-17 14:14:44
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风飘零

银虫 (正式写手)


karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢指教!
多糖不稳定,不宜放置时间过长
一般应在配制完后20分钟内测完
追求简单的幸福,却从不曾拥有~~~~~
7楼2007-11-17 15:20:28
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ychli315

金虫 (正式写手)

楼上的说的都挺好的
第一次做吧
一定要小心
重复几次以后就有经验了
步步高
8楼2007-11-17 18:10:07
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脱缰的蜗牛

木虫 (小有名气)

吸光度是负值的情况我也遇到过,可能和参比溶液的性质有关系。吸光度是负值的情况和空白没太大关系的应该。
9楼2007-11-17 22:10:34
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都市飓风

木虫 (小有名气)

我没有测过多糖,但也有遇到过类似问题,你看看会不会是溶液中有什么东西比较容易挥发,从而导致的不稳定数据.
10楼2007-11-18 01:20:18
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