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[求助]
求助!!!关于测番茄种子α淀粉酶的方法问题!!!请懂这个的大侠给个权威指导!
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我想请教个小问题~我要测α淀粉酶活力,看了好多实验指导,特别杂,上面大体上就是三种方法,第一种是用DNS测,先钝化粗酶液中的β淀粉酶,然后测钝化后的粗酶液和淀粉反应生成的麦芽糖的量,用麦芽糖做标准曲线,用单位时间内单位质量样品生成的麦芽糖含量多少衡量α淀粉酶活力;第二种是用碘-碘化钾,也是先钝化β淀粉酶,然后测剩余的α淀粉酶与淀粉反应后剩余的淀粉含量,没有标准曲线,用单位时间内单位质量样品可反应的淀粉质量衡量α淀粉酶活力;第三种也是用碘-碘化钾,但它是测粗酶液和β极限糊精反应后剩余的糊精量,用β极限糊精做标准曲线,用单位时间内单位质量样品可反应的β极限糊精量来衡量α淀粉酶活力;对这三种方法,1、α淀粉酶水解淀粉时,生成的麦芽糖多还是生成的糊精多?或者它能生成麦芽糖么?(因为我查资料说,α淀粉酶水解淀粉可生成短链糊精及少量麦芽糖和葡萄糖,这样第一种方法不就不容易测出麦芽糖含量了么?)2、我看实验指导上钝化β淀粉时,有用70℃ 15min钝化的,有用0.4M的氢氧化钠钝化的,这两种哪个好?或者钝化后再测α淀粉酶会不会误差变大?3、综合来看,我到底用哪种方法测α淀粉酶最准确?或者大家有更好的方法给我也分享分享!谢谢大家啦啦! 十分期待你的答案!谢谢啦! |
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