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logowang

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助emsa试验，有人尝试过直接用外源表达蛋白粗提掖进行Emsa的吗？ 已有1人参与

Hi all,
问一下是否有做Emsa的高手， 有人尝试过使用表达蛋白粗体液（大肠杆菌）直接进行Emsa试验的吗？杂条带如何？能否指点一下？

[ Last edited by silicare on 2014-2-26 at 16:32 ]
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1楼 2013-08-29 17:53:14
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大海一孤舟

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-08-30 16:52:55
这个没有试过，预测结果很混乱，蛋白太复杂
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2楼2013-08-30 16:39:39
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嘌呤霉素

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我做过细胞内过表达的蛋白进行的EMSA，细胞直接裂解后用的全蛋白去结合的，一个家族的几种蛋白都过表达了，结果最后发现都能与我的probe相结合，用的碧云天优化过得结合缓冲液，加上dI.dC后杂带倒不是很多  而且因为是过表达   目的条带很亮   可以爆出很清晰的条带
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3楼2014-09-02 11:29:53
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allegory

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
4楼2014-11-07 23:09:33
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