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如何筛选带菌毛的大肠杆菌,用于M13噬菌体感染
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使用M13制备单链探针,但是M13噬菌体仅感染带菌毛的大肠杆菌。因此首先要筛选培养一批带菌毛的大肠杆菌。 使用的菌株是JM109 Genotype( 基因型):end A1, rec A1, gyr A96, thi , hsd R17 (rk-, mk+),rel A1, sup E44, l-, △ (lac-pro AB), [F`, tra D36, pro AB, lac IqZ △ M15],lDE3。 根据分子克隆实验指南 可以采用以下方法筛选: 1.使用M9基本培养 2.加入抗生素卡那霉素筛选 本人一开始使用卡那霉素筛选,但是均失败告终。 然后使用M9固体培养基筛选方法,结果到现在还没发现有菌落出现 怎么回事??? 有没有做过的?? 请给一些意见!! 任何有帮助的意见! 急!! 谢谢!!! |
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