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小志1209

铜虫 (初入文坛)

[求助] HPLC测微囊藻毒素标准曲线问题

检测方法用的是高效液相色谱法,样品富集处理用的是固相萃取,想请教一下在做藻毒素标准品标准曲线时,标准品还需要过固相萃取柱吗?需要的话我要把上样萃取的标准品稀释到多少呢?比如说我的水样富集量为100ml,那我的标准品也要稀释到100ml再过柱子富集吗?有这个必要吗?还是直接把标准品做好浓度梯度直接放入进样瓶待测呢?求大神指导啊
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小志1209

铜虫 (初入文坛)

怎么就没人回答呢。。。。。。。。。
2楼2013-08-29 14:02:36
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水无痕

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
直接进标准品绘制的是标准曲线,标准品经前处理后在上样绘制的是工作曲线。两种方法都可以,样品依据前者标准曲线读出来的浓度需要除浓缩因子,后者则不需要转换。个人觉得后一种方法更严谨些。
3楼2013-08-29 16:41:13
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JacreePng

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小志1209: 金币+20, ★★★很有帮助 2013-09-04 12:24:32
高效液相色谱法测定MC-LR使用外标法定量已经比较准确,所以配制标曲的时候直接按比例稀释标液即可。
楼主所提的将稀释后的标准品过柱富集,只是为了确定富集回收率,完全没有必要将标液也通过固相萃取富集,那样只会增加工作强度,如需要确定富集效率,连带样品做一个样品加标即可。
PS:我目前使用的Horizon SPE-DEX4790固相萃取仪,富集1000倍,对加标量1微克的回收率在99%以上。一般情况下,饮用水和地表水中基本都是未检出。
4楼2013-08-29 21:58:00
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小志1209

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 水无痕 at 2013-08-29 16:41:13
直接进标准品绘制的是标准曲线,标准品经前处理后在上样绘制的是工作曲线。两种方法都可以,样品依据前者标准曲线读出来的浓度需要除浓缩因子,后者则不需要转换。个人觉得后一种方法更严谨些。

好吧,谢谢
5楼2013-09-04 12:15:19
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小志1209

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by JacreePng at 2013-08-29 21:58:00
高效液相色谱法测定MC-LR使用外标法定量已经比较准确,所以配制标曲的时候直接按比例稀释标液即可。
楼主所提的将稀释后的标准品过柱富集,只是为了确定富集回收率,完全没有必要将标液也通过固相萃取富集,那样只 ...

很有帮助,谢谢
6楼2013-09-04 12:19:25
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