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402403660

银虫 (初入文坛)


[交流] 转基因表达和gus染色相关

转基因草莓,PCR检测gus基因、npt基因和结构基因均为阳性,同时看到了非常明显的特异表型(应该是转入的基因表达了吧),但gus组织染色总是阴性(阳性对照染色没有问题),各位虫友不吝赐教啊~~~~PS:总共有7株转基因阳性的植株,都一样
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402403660

银虫 (初入文坛)


引用回帖:
2楼: Originally posted by 蓝色布拉格 at 2013-09-03 14:35:06
看到特异性不一定说明GUS基因表达了吧,有可能是插入的外源片段破坏了受体基因组的基因,导致其表型发生了变化。PCR可以扩到片段只能说明已经插入到受体基因组上了,表不表达还和好多因素有关系,比如GUS基因 ...

加我邮箱联系方便一些 zhangkai253314@163.com
3楼2013-09-04 16:05:40
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蓝色布拉格

新虫 (正式写手)


看到特异性不一定说明GUS基因表达了吧,有可能是插入的外源片段破坏了受体基因组的基因,导致其表型发生了变化。PCR可以扩到片段只能说明已经插入到受体基因组上了,表不表达还和好多因素有关系,比如GUS基因的调控序列等等。。。。,最近我在做食用菌的转基因,想问一下你的GUS染色液的配方,查了一些文献,试剂配方和用量都不太一致,试了一些,也没染出来,所以想看看你的配方,不知可否分享一下?
2楼2013-09-03 14:35:06
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haiyanciniao

金虫 (著名写手)


我的转基因水稻才坑人啊,染叶子染不上,但是染茎却有。我的目的是收种子,现在还在孕穗不开花。其他同一天种下去的都开花结实了
5楼2013-10-12 20:41:59
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platanus

木虫 (著名写手)


转基因检测是阳性植株的,GUS染色不一定能染上色的,因为虽然转入了,但是GUS不一定表达,这个跟插入的位置和插入的拷贝数有关。我以前也做启动子功能分析的,转化的阳性植株也有很多不能着色的!
6楼2013-10-14 14:59:41
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