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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 转基因表达和gus染色相关
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402403660

银虫 (初入文坛)

[交流] 转基因表达和gus染色相关

转基因草莓，PCR检测gus基因、npt基因和结构基因均为阳性，同时看到了非常明显的特异表型（应该是转入的基因表达了吧），但gus组织染色总是阴性(阳性对照染色没有问题)，各位虫友不吝赐教啊~~~~PS：总共有7株转基因阳性的植株，都一样
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1楼 2013-08-23 21:01:32
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402403660

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 蓝色布拉格 at 2013-09-03 14:35:06
看到特异性不一定说明GUS基因表达了吧，有可能是插入的外源片段破坏了受体基因组的基因，导致其表型发生了变化。ＰＣＲ可以扩到片段只能说明已经插入到受体基因组上了，表不表达还和好多因素有关系，比如ＧＵＳ基因 ...

加我邮箱联系方便一些 zhangkai253314@163.com
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3楼2013-09-04 16:05:40
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蓝色布拉格

新虫 (正式写手)
看到特异性不一定说明GUS基因表达了吧，有可能是插入的外源片段破坏了受体基因组的基因，导致其表型发生了变化。ＰＣＲ可以扩到片段只能说明已经插入到受体基因组上了，表不表达还和好多因素有关系，比如ＧＵＳ基因的调控序列等等。。。。，最近我在做食用菌的转基因，想问一下你的GUS染色液的配方，查了一些文献，试剂配方和用量都不太一致，试了一些，也没染出来，所以想看看你的配方，不知可否分享一下？
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2楼2013-09-03 14:35:06
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haiyanciniao

金虫 (著名写手)
我的转基因水稻才坑人啊，染叶子染不上，但是染茎却有。我的目的是收种子，现在还在孕穗不开花。其他同一天种下去的都开花结实了
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5楼2013-10-12 20:41:59
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platanus

木虫 (著名写手)
转基因检测是阳性植株的，GUS染色不一定能染上色的，因为虽然转入了，但是GUS不一定表达，这个跟插入的位置和插入的拷贝数有关。我以前也做启动子功能分析的，转化的阳性植株也有很多不能着色的！
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6楼2013-10-14 14:59:41
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