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SSH在研究植物体内代谢产物生物合成途径的相关问题
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请教虫友有关抑制性差减文库SSH的一些问题，看了些文献有采用SSH研究某种活性成分生物合成途径的，说明具有可行性，我也想做这方面的工作，但是以前没有做过，所以想从做过这方面的虫友那详细了解下，望大家不吝赐教 1）建立SSH文库，对样品RNA的质量要求如何？ 2）如果在样品RNA制备好的基础上，建立SSH文库大概需要多长时间（一般来讲）？受哪些因素的影响比较大？ 3）是不是只要处理和对照的目标产物差别较大，就能建立差减文库（就能筛出差异表达的基因，看有的文献筛出来的差异基因的个数相差很大），而筛出来的基因能够起调控作用的概率大概有多少？ 4）依据SSH得出的结论，必须通过RT-PCR或WB来验证吗？ 暂时想到这些，先谢谢各位了！ |
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