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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 柱子过载
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gutidog

金虫 (小有名气)

[交流] 柱子过载

现在我们实验室在用10*250mm苯基柱做制备型液相来分离皂苷，进样量在100ul和200ul的时候峰面积成正比。我们样品比较多，希望每次进样量越多越好，但怕柱子过载伤柱子。
想问下：柱子过载的标志是什么啊？过载了对柱子影响很大吗？
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从一个深渊跳入另一个！
1楼 2007-11-14 09:52:02
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gutidog

金虫 (小有名气)
到底是前沿峰还是拖尾峰啊？
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从一个深渊跳入另一个！
6楼2007-11-16 14:34:34
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hu66huhuhu

铁杆木虫 (正式写手)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢分享！
10×250mm的属于半制备柱，100～200ul的上样量已是较大的了。超不超载可能要具体问题具体分析：
1、样品较稀的话最好浓缩一下，够浓的话也许100ul即可，这样样品吸附集中些，也分得好些。
2、上样样品有多复杂，太复杂则不可多上样，宁愿多次。
3、可酌情调整每个CYCLE的时间，让整个实验时间缩短
4、超不超载以你所要的成分能不能与杂质分开为准，可灵活考虑上述条件进行适当调整，获得一个即满足实验时间又满足制备效果的折中方法。
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2楼2007-11-14 11:57:34
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zhjgcom

金虫 (小有名气)
看峰的形态如何呀，进样大时色谱峰有拖尾，而进样量小时色谱峰正常，说明大量时已超载，就可以减小进样量，还有进样量不是以体积计算吧，应以每次进样ug呀，还是mg为单位呀，更加直观，你以ul为单位，那浓度有可能变呀，进样量也是变的，所以要以成分质量为单位更好。
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3楼2007-11-15 10:19:39
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gutidog

金虫 (小有名气)

谢谢！

我们这个样品因为没有标准品，不知道浓度，已经不能再浓缩，否则会有沉淀的。现在进样200ul的时候色谱峰没有拖尾，应该可以进到200ul的。下次准备进200ul
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从一个深渊跳入另一个！
4楼2007-11-15 13:12:17
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