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gutidog

金虫 (小有名气)

[交流] 柱子过载

现在我们实验室在用10*250mm苯基柱做制备型液相来分离皂苷,进样量在100ul和200ul的时候峰面积成正比。我们样品比较多,希望每次进样量越多越好,但怕柱子过载伤柱子。
想问下:柱子过载的标志是什么啊?过载了对柱子影响很大吗?
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wei_wei_1983

木虫 (著名写手)

过载会出前沿峰!!!
我们的药学讨论空间http://kitbar.kilu.de/bbs/?fromuid=4 讨论群70414423
5楼2007-11-15 20:55:27
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hu66huhuhu

铁杆木虫 (正式写手)


karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢分享!
10×250mm的属于半制备柱,100~200ul的上样量已是较大的了。超不超载可能要具体问题具体分析:
1、样品较稀的话最好浓缩一下,够浓的话也许100ul即可,这样样品吸附集中些,也分得好些。
2、上样样品有多复杂,太复杂则不可多上样,宁愿多次。
3、可酌情调整每个CYCLE的时间,让整个实验时间缩短
4、超不超载以你所要的成分能不能与杂质分开为准,可灵活考虑上述条件进行适当调整,获得一个即满足实验时间又满足制备效果的折中方法。
2楼2007-11-14 11:57:34
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zhjgcom

金虫 (小有名气)

看峰的形态如何呀,进样大时色谱峰有拖尾,而进样量小时色谱峰正常,说明大量时已超载,就可以减小进样量,还有进样量不是以体积计算吧,应以每次进样ug呀,还是mg为单位呀,更加直观,你以ul为单位,那浓度有可能变呀,进样量也是变的,所以要以成分质量为单位更好。
3楼2007-11-15 10:19:39
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gutidog

金虫 (小有名气)

谢谢!

我们这个样品因为没有标准品,不知道浓度,已经不能再浓缩,否则会有沉淀的。现在进样200ul的时候色谱峰没有拖尾,应该可以进到200ul的。下次准备进200ul
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4楼2007-11-15 13:12:17
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