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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物效应评价 » MC3T3细胞成骨分化时地塞米松的用量？
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夏南

金虫 (正式写手)

深度强迫症患者

[求助] MC3T3细胞成骨分化时地塞米松的用量？

最近培养MC3T3-E1sub14向成骨细胞分化，检测ALP活性，矿化结节等指标。需要添加诱导培养基，但是看了好多文献对诱导培养基的成分含量都不同，特别是地塞米松，有10-8M的，有10-7M的，有10-5M的，请问大家实际诱导的时候都用的什么浓度？
PS：请问诱导培养基是加了抗坏血酸、甘油磷酸钠、地塞米松以后再过滤还是先过滤，再加入他们？过滤会不会把他们这些大分子过滤掉了？
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假装文艺青年的科技工作者。
1楼 2013-08-21 22:11:18
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

清风小李子

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
红舟流星: 金币+1, 应助指数+1, 专家考核, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-08-22 14:58:30
夏南: 金币+5, ★有帮助 2013-11-15 23:56:39
夏南(红舟流星代发): 金币+5, 代扣代发金币 2013-11-30 19:34:19
你好，我们课题组一般用量为 10 mM glycerol phosphate, 0.1 mM dexamethasone, and 50 mg/ml ascorbic acid in H-DMEM containing 10% FBS and 1% penicillin–streptomycin
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2楼2013-08-22 09:59:53
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夏南

金虫 (正式写手)

深度强迫症患者
引用回帖:
2楼: Originally posted by 清风小李子 at 2013-08-22 09:59:53
你好，我们课题组一般用量为 10 mM glycerol phosphate, 0.1 mM dexamethasone, and 50 mg/ml ascorbic acid in H-DMEM containing 10% FBS and 1% penicillin–streptomycin

额 ~~您确定没有打错吗？抗坏血酸你们加入的是50mg/ml？
那配一升培养基你们就加入50g？太夸张了吧。
你们用的细胞系不是MC3T3的吧？

不过还是谢谢你。
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假装文艺青年的科技工作者。
3楼2013-08-22 19:18:12
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r123ed

金虫 (著名写手)
用sigma的 10-6~10-8m 需dmso溶解后dd水稀释
10-5 无诱导作用 需单独过滤后加入培养基
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wangxueru wangxueru
shape memory
6楼2013-08-26 15:18:17
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普通回帖

夏南

金虫 (正式写手)

深度强迫症患者
没人回答吗？顶一下。

[ 发自小木虫客户端 ]
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假装文艺青年的科技工作者。
4楼2013-08-22 23:50:34
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iambaiyun

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
红舟流星: 金币+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-08-24 23:53:51
一些文献的地塞米松的浓度不一样应该与诱导分化的分化率与分化时间快慢有关系，建议设置几个浓度梯度，自己认真分析比较
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白云
5楼2013-08-24 13:34:30
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夏南

金虫 (正式写手)

深度强迫症患者
引用回帖:
6楼: Originally posted by r123ed at 2013-08-26 15:18:17
用sigma的 10-6~10-8m 需dmso溶解后dd水稀释
10-5 无诱导作用 需单独过滤后加入培养基

回复的时候没有选应助？给不了金币呀。

恩  后来我们选的就是10-8M这个浓度，

请教一下为什么浓度高了，10-5M反而没有诱导作用了呢？
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假装文艺青年的科技工作者。
7楼2013-08-26 16:04:58
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r123ed

金虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 夏南 at 2013-08-26 16:04:58
回复的时候没有选应助？给不了金币呀。

恩  后来我们选的就是10-8M这个浓度，

请教一下为什么浓度高了，10-5M反而没有诱导作用了呢？...

10-5 没有诱导作用，反而严重抑制增殖，这只是我个人实验中得到的结论，具体为什么没有深究过。因为不同公司地塞米松可能不太一样，我在丁香园还看到有用水溶解地塞米松的，也看到过10-4的地塞米松……
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夏南
shape memory
8楼2013-08-26 21:03:48
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夏南

金虫 (正式写手)

深度强迫症患者
送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by r123ed at 2013-08-26 21:03:48
10-5 没有诱导作用，反而严重抑制增殖，这只是我个人实验中得到的结论，具体为什么没有深究过。因为不同公司地塞米松可能不太一样，我在丁香园还看到有用水溶解地塞米松的，也看到过10-4的地塞米松……...

谢谢，谢谢，非常感谢，虽然你回答之前我就用的10-8配好了，但是听你这么一说，心里舒服多了，哈哈，幸亏没选10-5.你的这个实际经验真心有用呀。

你点个应助吧，我好给你金币呀。
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假装文艺青年的科技工作者。
9楼2013-08-26 22:49:21
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xhdyw

木虫 (著名写手)
不加地塞米松 就加抗坏血酸和β磷酸甘油之类的行么
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10楼2013-08-27 08:53:25
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