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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 氯霉素的平板难长？
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mikezlf

铁虫 (初入文坛)

[求助] 氯霉素的平板难长？

我们实验室用了两种感受态做带氯霉素的质粒转化，其中一种感受态一个晚上就长得很密了，然后刚摇菌也摇起来了，另外一种完全不长。请问一下氯霉素的板是不是比较难长？前面那种感受态会不会是杂菌污染？
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1楼 2013-08-14 18:49:02
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
带氯霉素的质粒的菌在Cmr板上长得很好，没问题。不会因为有氯霉素而长不好。
你第二个菌完全不长可能是转化没成功。你可以重新转一次试试。
可以在Cmr板上长则染菌的可能比较小。
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2楼2013-08-14 22:37:56
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们实验室有一个老师在做，也没看见有这么难？你用你的引物P一下抗氯霉素的基因，看看吧？
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3楼2013-08-14 23:48:11
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mikezlf

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by laozuzunzhe at 2013-08-14 22:37:56
带氯霉素的质粒的菌在Cmr板上长得很好，没问题。不会因为有氯霉素而长不好。
你第二个菌完全不长可能是转化没成功。你可以重新转一次试试。
可以在Cmr板上长则染菌的可能比较小。

第一种感受态全长出来了，第二种感受态全都没长，会不会是感受态的问题呢？
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4楼2013-08-15 00:15:47
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mikezlf

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Fleaves at 2013-08-14 23:48:11
我们实验室有一个老师在做，也没看见有这么难？你用你的引物P一下抗氯霉素的基因，看看吧？

质粒应该是没有问题，验证过的。thx anyway!
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5楼2013-08-15 00:20:29
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by mikezlf at 2013-08-15 00:15:47
第一种感受态全长出来了，第二种感受态全都没长，会不会是感受态的问题呢？...

感受态长出来就不正常了，你最好验证一下氯霉素好着没，我以前买过氯霉素两次失效。
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6楼2013-08-15 12:03:25
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mikezlf

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by laozuzunzhe at 2013-08-15 12:03:25
感受态长出来就不正常了，你最好验证一下氯霉素好着没，我以前买过氯霉素两次失效。...

我的意思是，用第一种感受态转出来的菌全长了，第二种转出来的菌没长==
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7楼2013-08-15 16:18:29
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by mikezlf at 2013-08-15 16:18:29
我的意思是，用第一种感受态转出来的菌全长了，第二种转出来的菌没长==...

两种感受态，分别转入了带氯霉素抗性的质粒，然后在氯霉素抗性平板上培养，一个长出来了，一个没有长出来是吧？如果是这样，那就应该是感受态细胞的问题，或者转化失败，没转化进抗性质粒。
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8楼2013-08-15 20:27:11
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wangnin

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by laozuzunzhe at 2013-08-14 22:37:56
带氯霉素的质粒的菌在Cmr板上长得很好，没问题。不会因为有氯霉素而长不好。
你第二个菌完全不长可能是转化没成功。你可以重新转一次试试。
可以在Cmr板上长则染菌的可能比较小。

您好，请问你有步骤吗，详细的，我在浏览这些板业的时候发下了很多人都做不出来带有氯霉素抗性的感受态，万分感谢
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9楼2017-10-25 20:06:45
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