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llz0616

木虫 (小有名气)

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性别: MM
专业: 药物化学

[求助] HPLC中的这句话怎么理解？

药典上的一段话：

测定法取己烯雌酚对照品适量，精密称定，加乙醇-水(1:1)溶解并稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取本品适量，同法测定，按外标法以已烯雌酚反式体峰面积和顺式体峰面积的总和（已烯雌酚顺式体峰的面积与1.26相乘）计算，即得。

请问：“按外标法以已烯雌酚反式体峰面积和顺式体峰面积的总和（已烯雌酚顺式体峰的面积与1.26相乘）计算”，这句话倒是是什么意思？

为什么要乘以1.26，峰面积之和不就是顺式和反式之和吗？

[ Last edited by llz0616 on 2013-8-14 at 10:45 ]

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1楼 2013-08-14 10:41:28

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晨露g

铁杆木虫 (著名写手)

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专业: 临床生物化学检验

【答案】应助回帖

★ ★ ★
llz0616: 金币+3 2013-08-18 20:42:38

引用回帖:

10楼: Originally posted by llz0616 at 2013-08-14 20:40:09
您能详细说一下吗，什么样的物质有校正因子，什么样的没有？...

一般情况下都会有吧。
定量校正因子（最常见）；由于同一检测器对不同物质的响应值不同，所以当相同质量的不同物质通过检测器时，产生的峰面积（或峰高）不一定相等。为使峰面积能够准确地反映待测组分的含量，就必须先用已知量的待测组分测定在所用色谱条件下的峰面积，以计算定量校正因子。
相对校正因子定义为
fi¢ = fi / fs
即某组分i的相对校正因子fi¢为组分i与标准物质s的绝对校正因子之比。
fi¢ =（mi /Ai）/（ms/As）=（mi / ms）·（As / Ai ）
可见，相对校正因子fi¢就是当组分i的质量与标准物质s相等时，标准物质的峰面积是组分i峰面积的倍数。若某组分质量为mi ，峰面积Ai ，则fi¢ Ai的数值与质量为mi的标准物质的峰面积相等。也就是说，通过相对校正因子，可以把各个组分的峰面积分别换算成与其质量相等的标准物质的峰面积，于是比较标准就统一了。这就是归一法求算各组分百分含量的基础。
相对校正因子的表示方法
上面介绍的相对校正因子中组分和标准物质都是以质量表示的，故又称为相对质量校正因子；若以摩尔为单位，相对摩尔校正因子；另外相对校正因子的倒数还可定义为相对响应值S¢（分别为相对质量响应值Sw¢、相对摩尔响应值SN¢）。通常所指的校正因子都是相对校正因子。
相对校正因子的测定方法
相对校正因子值只与被测物和标准物以及检测器的类型有关，而与操作条件无关。因此， fi¢ 值可自文献中查出引用。若文献中查不到所需的fi¢ 值，也可以自己测定。常用的标准物质，对热导检测器（TCD）是苯，对氢焰检测器（FID）是正庚烷。