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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 真是头痛的基因组DNA检测问题
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huhugagacai

新虫 (小有名气)

[交流] 真是头痛的基因组DNA检测问题

请问：用试剂盒提取DNA后，用分光光度计检测其纯度，值为何是3.3，而电泳跑胶后看到DNA条带干净，并无RNA污染。自我感觉提取过程没什么大问题。请问这是什么原因啊？？万分感谢哦
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1楼 2007-11-10 19:11:51
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yifanyifan

木虫 (正式写手)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):谢谢帮助，欢迎常来，
楼上的两位分析有道理,有时还要看看一起本身是否准确, 其实很多其他成分如糖类,蛋白也影响测定结果, 如果你有对照,比如公司合成的引物,可以测定一下,找找原因.不过大于2.0,理论上应该是RNA污染,你加些RNase 处理样品看看.

[ Last edited by yifanyifan on 2007-11-10 at 23:46 ]
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good good study
4楼2007-11-11 07:37:34
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niure

禁虫 (知名作家)
★
asr(金币+1,VIP+0):谢谢交流.
本帖内容被屏蔽
2楼2007-11-10 19:40:31
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xiaopu_yin

金虫 (小有名气)
分光光度计检测时受洗脱所用的溶液有关，你可以试一下试剂盒提供的洗脱液和双蒸水，误差还是比较大的。
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3楼2007-11-11 07:30:51
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reasonspare

木虫 (著名写手)
★
johnsooh(金币+1,VIP+0):thx, 多谢分析
是的，不知道楼主用的什么溶解的DNA，如果是试剂盒的，一半为Tris什么的，这时候浓度比较大一些。
如果你知道你用的试剂盒是什么东东，就更好了，
因为酚也影响， 胍 也影响。

兄弟还有提醒一下，不要淡淡看比值，，
OD230 和OD260， Od280的实际值 也不要太低，哈哈哈，否则不准，哈哈哈

[ Last edited by reasonspare on 2007-11-11 at 08:40 ]
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大慈大悲观世音救苦救难观世音有求必应观世音普渡众生观世音千手千眼观世音官大敢管观世音无处不在观世音普观普长观世音南无观世音菩萨
5楼2007-11-11 08:39:23
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