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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【交流求助】在表达体系中加入的抗生素量多了是否会影响目的基因的表达？
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lxdjxr

木虫 (小有名气)

[交流] 【交流求助】在表达体系中加入的抗生素量多了是否会影响目的基因的表达？

我在做基因表达的时候，ＰＥＴ２８a 连接了目的基因，在BL21中进行表达。
表达前在培养基中加入的KAN抗生素达到了50ug/ml，结果表达效果不是很好。不知道这么高的抗生素浓度是否会抑制目的基因的表达？


第一次感觉版主的权力， 我帮你修改了，下不为例。

[ Last edited by reasonspare on 2007-11-11 at 08:24 ]
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1楼 2007-11-10 17:00:58
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reasonspare

木虫 (著名写手)
★
johnsooh(金币+1,VIP+0):thx, 谢谢斑斑
楼主你最好看看，你所用载体的原始文献，只要不高于他的最高限，就没有关系，
抗生素影响基因表达的文献也有，综合考虑问题，50mg/ml。 一般高。
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大慈大悲观世音救苦救难观世音有求必应观世音普渡众生观世音千手千眼观世音官大敢管观世音无处不在观世音普观普长观世音南无观世音菩萨
3楼2007-11-11 08:28:18
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xiaopu_yin

金虫 (小有名气)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):谢谢帮助，欢迎常来，
抗生素加多了会给细胞太大的环境压力，影响其自身生长，也影响蛋白表达。
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2楼2007-11-11 07:36:04
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fw1980613

银虫 (小有名气)
★
johnsooh(金币+1,VIP+0):thank you for your kind advice!
其实抗生素本来就是一个抑制因素
无论在抗与不抗的两种生物中都是这样的
在实验条件允许的情况下，尽量少加抗生素
完美的是不加抗生素
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4楼2007-11-11 10:48:33
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GeminiRR

铜虫 (小有名气)
★
johnsooh(金币+1,VIP+0):thx
这个载体的说明书会有抗生素的适宜浓度，我觉得一般的浓度会比较合适一些。
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5楼2007-11-11 13:15:49
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