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daisyhappy

铜虫 (小有名气)

[交流] 病毒保存液配方

大家用的病毒保存液配方是什么？请踊跃发言哈
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1楼 2013-08-12 18:01:39
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zhujw126

禁虫 (初入文坛)
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daisyhappy(金币+1): 谢谢参与
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3楼2013-08-14 11:37:37
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cu113

新虫 (初入文坛)
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daisyhappy(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-04 09:46:00
1、加20%甘油保存；
2、直接冻存。
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4楼2013-09-02 15:26:48
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beibei9535

荣誉版主 (职业作家)
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daisyhappy(金币+1): 谢谢参与
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3楼: Originally posted by zhujw126 at 2013-08-14 04:37:37
一般都是直接收上清冻存-80的

啊？什么病毒可以冰冻80？还有毒性？好神奇的啊。。
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5楼2013-09-03 05:01:15
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beibei9535

荣誉版主 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhujw126 at 2013-08-14 04:37:37
一般都是直接收上清冻存-80的

啊？什么病毒可以冰冻80？还有毒性？好神奇的啊。。
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6楼2013-09-03 05:01:22
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beibei9535

荣誉版主 (职业作家)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-04 09:46:43
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4楼: Originally posted by cu113 at 2013-09-02 08:26:48
1、加20%甘油保存；
2、直接冻存。

你的意思是保存感染的细胞吧。。。对于病毒能加甘油嘛？因为我觉得甘油是保护细胞的。病毒没有细胞结构，所以我不认为可以直接加甘油。除非是保存感染有病毒的细胞吧？求解释，谢谢哦。
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7楼2013-09-03 05:02:45
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beibei9535

荣誉版主 (职业作家)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cu113 at 2013-09-02 08:26:48
1、加20%甘油保存；
2、直接冻存。

你的意思是保存感染的细胞吧。。。对于病毒能加甘油嘛？因为我觉得甘油是保护细胞的。病毒没有细胞结构，所以我不认为可以直接加甘油。除非是保存感染有病毒的细胞吧？求解释，谢谢哦。
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8楼2013-09-03 05:04:24
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beibei9535

荣誉版主 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhujw126 at 2013-08-14 04:37:37
一般都是直接收上清冻存-80的

啊？什么病毒可以冰冻80？还有毒性？好神奇的啊。。
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9楼2013-09-03 05:04:41
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cu113

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by beibei9535 at 2013-09-03 05:02:45
你的意思是保存感染的细胞吧。。。对于病毒能加甘油嘛？因为我觉得甘油是保护细胞的。病毒没有细胞结构，所以我不认为可以直接加甘油。除非是保存感染有病毒的细胞吧？求解释，谢谢哦。...

加甘油能使病毒保存时间长一点，毒价掉得慢一点，但对以后复溶有一定的不便。
长期保存病毒最好还是直接液氮冻存，一般病毒在一个月内保存的话，-20就够了。
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10楼2013-09-03 09:49:05
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cu113

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by beibei9535 at 2013-09-03 05:04:41
啊？什么病毒可以冰冻80？还有毒性？好神奇的啊。。...

这要看保存时间了，短期的话（1个月左右）很多病毒冻-80完全可以的，一般-20都够了。
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11楼2013-09-03 09:50:53
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liyu6655

禁虫 (小有名气)
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12楼2013-09-03 13:34:51
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beibei9535

荣誉版主 (职业作家)
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引用回帖:
12楼: Originally posted by liyu6655 at 2013-09-03 06:34:51
-80保存病毒常年都可以，只不过再次用的时候要重新活化。当然不是所有病毒都可以。

Oh! Good to know! 我一点都不知道。那你工作什么病毒呢？只用80%的甘油和水在-80C就好？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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13楼2013-09-03 13:38:50
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liyu6655

禁虫 (小有名气)
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14楼2013-09-04 08:53:08
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daisyhappy

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by liyu6655 at 2013-09-04 08:53:08
不需要加甘油，只是培养物直接冻融然后分装冻存就行。我做肠道病毒

谢谢，我知道首次保存是不需要冻存液的，但是怎样避免反复冻融对滴度的影响就显得比较重要了。
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15楼2013-09-04 15:42:43
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yanshuai511

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们做的是腺病毒，腺病毒纯化透析后，分装，防止反复冻融，保存在10%甘油PBS里面。
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16楼2013-09-04 20:54:38
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daisyhappy

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by yanshuai511 at 2013-09-04 20:54:38
我们做的是腺病毒，腺病毒纯化透析后，分装，防止反复冻融，保存在10%甘油PBS里面。

谢谢，那你们测过冻融一次后的病毒滴度吗？
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17楼2013-09-05 13:47:55
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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)
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BioG病毒保存液可用于口腔拭子洗脱液、生殖道拭子洗脱液、唾液、尿液、血清、胸水、腹水、体腔积液等检测用样本的保存,可用于后续的核酸提取或纯化等
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18楼2020-05-13 14:22:32
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山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)
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5楼: Originally posted by beibei9535 at 2013-09-03 05:01:15
啊？什么病毒可以冰冻80？还有毒性？好神奇的啊。。...

什么病毒基本都可以
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19楼2020-05-15 09:42:57
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山木有林

禁虫
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20楼2020-08-03 10:52:28
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czbd2016

铜虫 (小有名气)
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好久没自己配过了，我们现在用的是BIOG病毒保存液，不影响Taq酶的活性，主要用于核酸检测使用，添加BIOG病毒保存液的样本可-20℃保存1年，比之前更方便了，建议你也试试
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21楼2020-08-06 09:28:12
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czbd2016

铜虫 (小有名气)
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8楼: Originally posted by beibei9535 at 2013-09-03 05:04:24
你的意思是保存感染的细胞吧。。。对于病毒能加甘油嘛？因为我觉得甘油是保护细胞的。病毒没有细胞结构，所以我不认为可以直接加甘油。除非是保存感染有病毒的细胞吧？求解释，谢谢哦。...

我觉得也是细胞吧，目前细胞冻存很多都选甘油做保护剂，因为甘油能提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。
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22楼2020-08-06 09:32:27
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Liu19851225

金虫 (小有名气)
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7楼: Originally posted by beibei9535 at 2013-09-03 05:02:45
你的意思是保存感染的细胞吧。。。对于病毒能加甘油嘛？因为我觉得甘油是保护细胞的。病毒没有细胞结构，所以我不认为可以直接加甘油。除非是保存感染有病毒的细胞吧？求解释，谢谢哦。...

必须要加甘油，避免低温冷冻破坏病毒结构
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23楼2020-08-06 14:55:58
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山木有林

禁虫
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24楼2020-11-04 14:52:10
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junjieshao

禁虫 (小有名气)
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25楼2020-11-05 00:42:04
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yingying15882楼
2013-08-12 22:28   回复  
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