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求助Western bloting高手
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本人在做WB中经常遇到几个问题,无助,希望得高手指点: 1.如何做>150KD的蛋白检测?除了调整胶浓度之外,有没有其它要注意的?或是在样品处理,跑胶转膜中要怎么做? 2.如何做<15KD的蛋白检测?除了解决胶浓度外,膜用0.2um孔径,还有没有其它办法,同时小分子在跑胶过程中,小分的蛋白容易弥散或是出现不规则的条带或分布,有没有解决办法? 3.在做组织蛋白检测中,怎么样去除其中的杂质干扰(比如糖类,脂类物),这些会导致在跑胶中使蛋白样品走胶变形,或是导致样口在胶中不规则分布,同时在小分子量蛋白中会容易弥散.这是不是关键在样品处理上有问题?应该怎么处理呢?一般我是用组织匀浆器匀浆.后离心的.我怀疑是否是组织样取得太多? 期盼WB高手给予解决意见. |
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