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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » [求助]求助用protein G agarose纯化兔多抗的问题
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匿名

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1楼 2013-08-08 21:25:05
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swlsangon

木虫 (小有名气)

快乐的木虫

【答案】应助回帖

遇到这种情况，有两种方法提供给你，要是想要抗体纯度高的话，用蛋白抗原亲和纯化；如果要求不高的话，建议用Protein A纯化，ProteinG对小鼠效果比较好。
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生命在于运动
6楼2015-03-17 12:18:00
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你应该用抗原, 而不是protein G来纯化抗体. 使用protein G的话纯化前样品里面的所有抗体(你想要的多抗, 以及兔子体内本来就有的)都会被纯化出来. 所以造成western背景的其他抗体并没有被消除掉.
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2楼2013-08-09 01:56:47
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匿名

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3楼2013-08-16 16:02:05
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我知道有两种办法， 一是把抗原蛋白交联在柱子上（比如Agarose）, 一种是把抗原蛋白点PDVF膜上. 然后用它们对血清里面你真正要的多抗进行纯化富集
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4楼2013-08-16 16:24:28
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