【答案】应助回帖
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tongliwoai: 回帖置顶 2013-08-08 12:44:52
jiangchunyong: 金币+1, PhEPI+1, 谢谢 欢迎常来 2013-08-11 08:39:00
tongliwoai: 金币+27, ★★★★★最佳答案 2013-10-05 11:12:44
氨基柱在含水量多的情况下是很不稳定的。也不宜在强酸的环境下使用。用的是缓冲液,则先用水/乙腈清洗再用乙腈冲洗,氨基住其本质属于正相柱,使用氨基柱除了采用正相系统作为流动相以外,一般还采用乙腈-水作为流动相,但是要求乙腈的含量不得低于70%,含水过多的流动相对氨基柱有损害,一般尽量不要用含水过多流动相。在此说一下氨基柱的使用注意事项,希望对你有用。
1反相条件下使用时,要特别注意控制pH值范围,pH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。最理想的pH范围在pH 3.0-7.0
2. 流动相一定要过滤,色谱级的乙腈,水相采用0.22um的滤膜过滤的超纯水。如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。
3.色谱柱的冲洗:流动相如果含有缓冲盐,实验分析完毕之后,用不少于缓冲盐比例的纯水、CH3CN冲洗10倍-20倍柱容量,(但是纯水的量不宜超过40%,例如客户用的流动相是30%的缓冲液,则可以用35%比例的纯水将缓冲盐缓慢洗脱出来),再用100%CH3CN冲洗10倍柱容量,之后保存在100%CH3CN中。
4. 色谱柱的保存反相使用时,如短期不用,可用乙腈保存;长期不用时最好将甲醇依次用异丙醇置换,最后用正己烷保存。
5.建议使用保护柱,并经常更换保护柱 。 |