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ssyyll1019

铜虫 (小有名气)

BioEPI: 1
应助: 3 (幼儿园)
金币: 1034
帖子: 241
在线: 144.1小时
虫号: 818956

[交流] 腹水单抗纯化没有效价

大家好，小弟最近纯化小鼠腹水单抗，碰到了一个奇怪的问题。
我用辛酸-硫酸铵方法纯化抗体，纯化前腹水ELISA 检测，显示有效价，但纯化后经PBS透析后，再检测，却没有效价了。
请问，这种情况是抗体失活了，纯化过程中ph没有极端变化（4.5-7.4之间），整个过程都是在4°下进行的。是什么情况导致纯化后的抗体失活了呢？
电泳图片SDS-PAGE 还原胶，感觉轻链条带很弱。

腹水单抗纯化没有效价

igg.jpg

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1楼 2013-08-06 15:27:09

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wolfman840

木虫 (正式写手)

BioEPI: 2
应助: 225 (大学生)
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帖子: 702
在线: 63.2小时
虫号: 902627

★
ssyyll1019(金币+1): 谢谢参与

是不是透析把轻链给透没了？你选的多少K的透析膜？另外，你纯化还用沉淀法啊，可以用预装的重力柱进行，效果比这个好。

18楼2013-08-13 08:18:16

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wswsjz

木虫 (职业作家)

应助: 66 (初中生)
金币: 3265.5
帖子: 3032
在线: 506.1小时
虫号: 511383

★
ssyyll1019(金币+1): 谢谢参与

Best wishes for you

9楼2013-08-06 16:44:56

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