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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 腹水 单抗纯化 没有效价
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ssyyll1019

铜虫 (小有名气)

[交流] 腹水 单抗纯化 没有效价

大家好，小弟最近纯化小鼠腹水单抗，碰到了一个奇怪的问题。
我用辛酸-硫酸铵方法纯化抗体，纯化前腹水ELISA 检测，显示有效价，但纯化后经PBS透析后，再检测，却没有效价了。
请问，这种情况是抗体失活了，纯化过程中ph没有极端变化（4.5-7.4之间），整个过程都是在4°下进行的。是什么情况导致纯化后的抗体失活了呢？
电泳图片SDS-PAGE  还原胶，感觉轻链条带很弱。
腹水 单抗纯化  没有效价
igg.jpg
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1楼2013-08-06 15:27:09
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wolfman840

木虫 (正式写手)
★
ssyyll1019(金币+1): 谢谢参与
是不是透析把轻链给透没了？你选的多少K的透析膜？另外，你纯化还用沉淀法啊，可以用预装的重力柱进行，效果比这个好。
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18楼2013-08-13 08:18:16
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wswsjz

木虫 (职业作家)
★
ssyyll1019(金币+1): 谢谢参与
Best wishes for you
赞一下 回复此楼
9楼2013-08-06 16:44:56
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