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glzeng

金虫 (小有名气)

[交流] 求助,多肽的分离提纯

各位虫友:
      我在学校期间是做有机高分子材料的,现在在一家生物公司上班,最近在做一个多肽的合成,是用液相的方法聚合的,目标分子的分子量为5000-11000,粗产品已经拿到了,可现在我不知道该用哪种方法进行分离提纯。希望得到大家的帮助!
      我的一个思路是先用透析的方法除去小分子,这个我已经定购了截流量为5KDa的透析膜,但是大分子的去除现在成了问题,本来是想买PLCCC 10(截留量为30KDa)这种超滤膜进行超滤(现在做的量很小,<1g),但是好象还需要一个叫Pellicon XL的装置,在不能确定这个项目能否做出来之前估计公司是不会购买的,不知道不用这个装置是不是也能做?如果能做该怎么做?
      另外一个思路是用凝胶过滤的方法进行分离,目前我手上有Sephadex G25, Sephadex G50两种凝胶,也用这种方法试了一下,但同样面临着滤液的监测问题(现在用的HPLC上的紫外监测器),我不知道什么时候出来的滤液才是我要的产品(分子量符合要求),大家有什么好的建议,请不吝赐教!谢谢大家了!
[search]分离提纯[/search]
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yrzh0205

铁虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教!
是否可以用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳?
该电泳的原理是用变性剂SDS改变蛋白质的构象,使之呈雪茄烟状,电泳的迁移率只与蛋白或多肽的分子量有关。再用一已知的分子量相近的多肽作为标准比对,迁移率相近的条带,就为你所要的目标物

[ Last edited by yrzh0205 on 2007-11-7 at 20:43 ]
2楼2007-11-07 20:42:19
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