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meizhou

木虫 (知名作家)

沉墨于心，不没于物
冷冻组织的来源：1）新鲜组织；2）甲醛固定过的组织；3）原来冷冻储存的组织。取出的组织标本应该尽量减少其含水量。
大小：2.5cm×1.5cm×0.3cm

方案1：全过程10min  切片后固定
新鲜组织取材
立即置入超低温冰箱/液氮冷冻2min (锡箔纸包裹后冷冻，用于组织的保存)
用OCT包埋在冰冻头子上，切片0.5～30微米
风干/固定     冷丙酮固定/乙醚酒精混合液固定(乙醚、95%酒精等量混合) 1min
染色: 切片水洗10S→入苏木素2min→水洗10S→1%盐酸分化10S→水洗30S→置入促蓝液蓝化1min→水洗10S→伊红染色30S→脱水30S，2次→透明1min→封固。（促蓝液:碳酸钠3.5g、硫酸镁20g、蒸馏水2000ml）
  
方案2：  切片前固定
新鲜组织取材后，
4%甲醛固定固定2h或以上
入15%、20%、30%蔗糖溶液（0.1M PBS，pH7.4），浸泡至组织块沉底
冰冻切片机切片，
贴片，风干，-20度保存备用
染色：切片水洗→入苏木素2min→水洗→1%盐酸分化→水洗→置入促蓝液蓝化1min→水洗→伊红染色→脱水→透明→封固。
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《memory》---BarbaraStreisand
11楼2007-11-08 15:42:08
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meizhou

木虫 (知名作家)

沉墨于心，不没于物
已经搞定,方法和大家分享一下

[ Last edited by meizhou on 2007-11-8 at 15:54 ]
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《memory》---BarbaraStreisand
12楼2007-11-08 15:49:42
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