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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » microRNA慢病毒过表达载体构建过程和原理。
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rockstonebob

银虫 (初入文坛)

[交流] microRNA慢病毒过表达载体构建过程和原理。

向各位请教一些关于microRNA过表达慢病毒载体构建的具体过程及原理的教程。本人查了一些资料，但始终无法甚解其中的步骤过程和原理。期待高人点拨，使得本人拨云见日，茅塞顿开。
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当时明月在，曾照彩云归！
1楼 2013-08-03 22:30:10
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大鹏鸟100

木虫 (著名写手)
这个版块喷子较多，你来请教这么专业的问题想得到答案比较难啊。

原理简单而言就是通过把质粒转染到细胞里，转录生成pri-miRNA，在细胞本身的DICER、RISC剪切下生成pre-miRNA和成熟的miRNA.至于转录为什么会生成pri-miRNA，应该是和你的质粒的元件、以及你插进去的DNA序列(颈环结构）有关。
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2楼2013-08-04 15:23:57
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世外清风

铁杆木虫 (职业作家)
可以直接联系吉玛之类的公司做，做的公司很多的。
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3楼2013-08-04 21:50:46
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rockstonebob

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 大鹏鸟100 at 2013-08-04 15:23:57
这个版块喷子较多，你来请教这么专业的问题想得到答案比较难啊。

原理简单而言就是通过把质粒转染到细胞里，转录生成pri-miRNA，在细胞本身的DICER、RISC剪切下生成pre-miRNA和成熟的miRNA.至于转录为什么会生成 ...

我想了解的是构建的过程和原理。不是发挥作用的过程。谢谢！
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当时明月在，曾照彩云归！
4楼2013-08-05 00:02:34
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大鹏鸟100

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by rockstonebob at 2013-08-05 00:02:34
我想了解的是构建的过程和原理。不是发挥作用的过程。谢谢！...

我说的是大概的原理，也不是发挥作用的过程啊。构建的过程就是合成两条互补的DNA链，退火变为双链，然后酶切（或者不酶切），通过T4 DNA连接酶，连到载体上。
不知道你想知道什么样的原理？
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5楼2013-08-05 01:04:02
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