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mikezlf

铁虫 (初入文坛)

[求助] 在固体培养基内形成梯度

由于实验室做关于趋化性的菌要在一块固体培养基内形成某种物质的浓度梯度,请问各位高手有什么方法么?
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Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, good! 2013-08-03 22:50:22
要看你所谓的梯度是什么概率了,如果需要明确的浓度,而且梯度不是很多的话,就自己用不同的平板,每个平板倒等量但不同浓度试剂的培养基(使得到等厚度培养基),然后自己用刀片切割,在拼接就好。如果就要一个梯度,我觉得你可以倒一空白平板(不含你的试剂),然后倒一高浓度平板,将一定大小的高浓度平板切下放到空白平板的顶端,利用试剂的扩散作用得到均等的梯度,写paper的时候只要注明你高浓度平板的浓度,所转移体积大小,以及接菌点与试剂点距离就ok!Good luck!
互助互励,共奋共进!!
2楼2013-08-03 20:52:30
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梦醒已千年

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2013-08-03 22:50:34
建议你在平板上放上隔板隔开,然后倒板。
你不知道的天空依然蔚蓝
3楼2013-08-03 22:05:15
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mikezlf

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Sthunder at 2013-08-03 20:52:30
要看你所谓的梯度是什么概率了,如果需要明确的浓度,而且梯度不是很多的话,就自己用不同的平板,每个平板倒等量但不同浓度试剂的培养基(使得到等厚度培养基),然后自己用刀片切割,在拼接就好。如果就要一个梯度 ...

固体的话利用试剂的扩散不是要好久?==
4楼2013-08-04 00:35:38
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mikezlf

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 梦醒已千年 at 2013-08-03 22:05:15
建议你在平板上放上隔板隔开,然后倒板。

神马意思 ?没懂==
5楼2013-08-04 00:37:23
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见神一笑

木虫 (著名写手)

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zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2013-08-04 11:50:47
我见过一种办法,挺简单的,先在平板内倒一层不加该物质的培养基,倒完后斜着放置,凝固后再倒上加了该物质的培养基,这样的话,虽然没有直接形成浓度梯度,但是每个菌能够获得的该物质是呈线性的,也等于形成了浓度梯度。我语言组织不好,不知道楼主看懂了没?
好好努力
6楼2013-08-04 10:15:16
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馨沁

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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倒双层培养基即可,倾斜放置凝固
7楼2013-08-04 10:29:02
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mikezlf

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 见神一笑 at 2013-08-04 10:15:16
我见过一种办法,挺简单的,先在平板内倒一层不加该物质的培养基,倒完后斜着放置,凝固后再倒上加了该物质的培养基,这样的话,虽然没有直接形成浓度梯度,但是每个菌能够获得的该物质是呈线性的,也等于形成了浓度 ...

嗯~如果要配半固体是不是就不能这么配了啊?
8楼2013-08-04 15:21:15
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见神一笑

木虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by mikezlf at 2013-08-04 15:21:15
嗯~如果要配半固体是不是就不能这么配了啊?...

这个我就不清楚了,你问下7楼
好好努力
9楼2013-08-05 11:47:51
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wzq_ing

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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这个一般都是两层,分别到,用倾斜的方式,不同厚度的位置,形成浓度梯度
方法如六楼所说,
10楼2013-08-05 13:37:00
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