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一个月来的科研体会
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今天，想在这里写点东西，为这一个月来的实验做个总结，同时希望给朋友们一点经验。 我研究的是脱金属硫蛋白与铅离子的结合，事先声明，我以前是学工科的，对分析方面没有过接触。 首先，我为了做定量研究，先要对脱金属硫蛋白做定量分析，根据半胱氨酸与DTNB反应后的产物在412nm处有特征吸收，做出一条标准曲线。然后再接着往下做。 这个月来只是做出了浓度曲线，可以说进展缓慢，有以下经验教训： 1.注意半胱氨酸极易氧化，所以除氧很重要。在一开始，我很纳闷，总是在412处没见到吸收峰，后来想想，是在配溶液时，没有事先除氧，尽管是现配现做，但事先对溶剂除氧至关重要。于是在对溶剂事先除氧后，吸收峰处明显上升了，但还不是需要的峰，于是转到下一点。 2.我每次做紫外检测时，都是在300nm附近有一个吸收值为5的峰，相当大，这样，在412处只有一个类似于肩峰的样子的一个小包，分析是DTNB的峰太大，即DTNB浓度太大。于是，考虑用滴加DTNB的方法，保证DTNB过量，但其浓度不是太大，最后得到的结果非常理想。 3.扣背景。即在做紫外吸收时，要注意要做浓度为0的吸收，这样才能确实以后做出来的是我要的峰。 4.除氧。在通氮气除时，并不是通气速度越快越好，相反，当过快时，会形成湍流，这样的效果反而不好。最好是只要看到有连续的气泡就可以了，一般时间为30分钟。 说了这么多，有什么不对的，请高手指点指点。 [search]脱金属硫蛋白[/search] |
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