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Airare金虫 (正式写手)
虫游天下
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[交流]
测序！测序！测不出无信号啊～～！
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虫虫们好！直接说问题了： 重组质粒构建，质粒提取，跑个电泳，OK，大小正确； PCR验证有目的条带，很明显，正确； 双酶切，目的条带很明显，但是载体切不出来。呈现三条带，除目的条带外，另一条×2刚好是载体，重复仍是如此！ （20ul体系：TaKaRa Xho I/ EcoR I 各1ul,质粒4ul ,10*通用buffer 2ul,dH2O 12ul，按说明37度，3h或过夜都试过，结果一样！1%琼脂糖凝胶 TAE电泳液） 后来不管了，测序去！一次送质粒，二次仍质粒，不同测序公司都没有信号啊！（自己提的质粒浓度检验还是不错的，酶切也用同样的质粒啊）；再后来换菌液测序，仍无信号！ 故事搁浅，目前结局很郁闷啊！虫虫帮提提建议～  |
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guohuayin
木虫 (著名写手)
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2楼2007-11-06 17:02:25