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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 2010版药典修正版微生物限度菌种接种和稀释怎么做
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qcsgx

铜虫 (小有名气)

[交流] 2010版药典修正版微生物限度菌种接种和稀释怎么做 已有5人参与

2010版药典修正版微生物限度，微生物计数法中，接种和稀释，所加菌液的体积不超过供试液体积的1%，试验组中，取供试液，加菌液混匀，使每1ml供试液含菌量不大于100cfu。这一步中，怎么计数啊？怎么才能做到使每1ml供试液含菌量不大于100cfu？
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1楼 2013-08-01 16:22:57
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wmwnyxt

金虫 (小有名气)
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laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2013-08-03 22:47:10
计数培养液中的细胞浓度，然后根据要求稀释或者浓缩（先离心再按照要求加培养液，混匀即可）。
或是测下菌体的吸光度，一般0.1代表10的八次方而后你在稀释倍数即可。
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Ifyouwanttocatchupwiththepaceoflife,youshouldfullfillyourselfatfirst
2楼2013-08-02 11:52:43
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老娘爱吃肉

木虫 (正式写手)
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laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2013-08-03 22:47:20
吸取一定体积的菌悬液，用血球计数法在显微镜下查数，就能确定了
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3楼2013-08-03 10:18:25
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鹿鹿_1130

铁虫 (正式写手)
★
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你选择什么方法了吗？这个我也不懂，现在你明白了吗？
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做一个可以奋斗的人！
4楼2013-08-06 14:49:33
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Zeb986619

新虫 (初入文坛)
★
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关注楼主的提问。怎样接种菌株呢，有图有真相就好了。
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5楼2015-09-23 10:18:20
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zhouh2001

新虫 (初入文坛)
★
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是不是做方法适用性验证呀？是的话，你先要自己试验下手法的，第一步你要知道比如从斜面挑出菌落然后生理盐水稀释，稀释多少倍能在平板长出差不多多少CFU的。假设你稀释1000倍以后1ml菌液能长500CFU，你的供试液是10ml，那么按照不超1%要求，往里面10ml供试液+0.1ml然后混匀，然后排除你供试液里面自身带菌你这样1ml就能长出50cfu。当然你要控制在100cfu以内的话，建议先做预实验，看看供试品本身能长多少菌，然后调整菌液稀释倍数。
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6楼2015-09-23 22:27:20
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