| 查看: 351 | 回复: 0 | |||
[交流]
新人诚意请教，不知是否发对版面，关于农杆菌转化
|
| 重组质粒冻融法转入农杆菌AGL1菌株，方法和系统均没问题，转化后得到的colony证实是转入了重组质粒，但奇怪的问题出现了。构建的重组质粒用于敲除某基因，在质粒上selective marker两侧插入了同源片段，即存在左右同源序列臂。用PCR验证农杆菌转化colony，selective marker能扩增出，证明质粒已转入农杆菌细胞，但当用左右同源序列引物扩增验证时发现一个colony只能扩增出左臂或者右臂，随机挑选10个colonies，大概有一半只能扩出左臂，而另一半只能扩出右臂。转化用的重组质粒验证无问题，农杆菌感受态重新制备过，其他人使用正常，以前做的也没问题。现在不知道问题在哪了，卡在这个问题上几个月了。这里高人多，期望有经验的老师帮忙解解惑， |
回复此楼» 猜你喜欢
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有297人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有0人回复
