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积云降晚露

新虫 (小有名气)

[求助] 线粒体基因组全序列,最后一段总扩不出来。。求大神前辈们提提建议~ 已有1人参与

本人分子实验刚入门,近期在做线粒体基因组全序列,用Long PCR,可是16S-COI的那一段总扩不出来,尝试过很多对引物,包括文献中的和自己设计的,也尝试过不同的PCR反应程序。。。。请问可能是什么原因呢?是酶的问题吗?有什么解决方案呢?求各位前辈提提建议~
拜谢!
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zllouc

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

PCR不成功一般就是引物的原因,Long PCR引物最好在26 bp左右。
爱拼才会赢!!!
2楼2013-08-23 08:33:19
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Longnil

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也正在愁呢,提了全基因组也没扩出来16S怎么办……
lifeisbeautiful
3楼2015-04-02 14:21:52
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王希望

铁杆木虫 (正式写手)

换一个好用的酶,不一定是引物问题
4楼2015-04-03 16:09:34
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